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申请/专利权人：海绵城市建设(上海)有限公司

摘要：本发明涉及环境修复和污水处理技术领域，尤其是涉及用于河道湖泊生物修复土著微生物的定向扩增方法及应用。本发明通过定向扩增，富集筛选出硝化细菌菌群、好氧异养菌群，反硝化细菌菌群三大土著微生物功能菌群，配合河道曝气、底泥生物修复等技术，应用于河道、湖泊水质净化和生态修复。土著微生物制剂取自河道底泥，适应性强，可直接定植在河道湖泊生态系统功能微生物种群或群落中，实现高效水质净化和底泥修复，效果持续性好；无生物安全性问题，不存在生物入侵和生态风险等问题；生产价格低，可广泛应用于黑臭河道治理、城市河道水质提升，根据具体情况，配合河道曝气、底泥生物修复等技术，实现“一河一策”、“一河一菌”，提高河道治理效率。

主权项：1.一种用于河道湖泊生物修复的土著微生物定向扩增方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）底泥采集及清理：从河道湖泊采集底泥，清理除去底泥中垃圾和砂；（2）富集培养：将步骤（1）得到的清理后的底泥通过富集培养基一次培养，得到土著微生物第一原种，每种土著微生物第一原种筛选2-3组；（3）二次培养：将步骤（2）筛选出的土著微生物第一原种作为菌种，再次加入富集培养基二次培养，得到土著微生物第二原种；（4）扩大培养：将步骤（3）得到的土著微生物第二原种作为菌种，添加到扩大培养基中，利用培养罐培养，最终形成功能性土著微生物菌群产品；所述用于河道湖泊生物修复的土著微生物包括硝化细菌菌群、反硝化细菌菌群、好氧异养细菌菌群；步骤（2）中，硝化细菌菌群富集培养基各组分、配比及培养方式如下：NH42SO430g，NaNO21g，MgSO4·7H2O50g，MnSO4·4H2O1g，CoSO40.1g，FeSO4·7H2O4g，K2HPO4150g，CaCO3500g，河道湖泊水100kg；培养方式：曝气至溶氧保持4mgl以上，加碳酸钙使pH保持7-8；培养3-7天；反硝化细菌菌群富集培养基各组分、配比及培养方式如下：红糖5.0kg，尿素0.25kg，奶粉0.125kg，酵母浸膏0.8kg，EDTA0.5g，CaNO32·4H2O300g，CoSO40.1g，河道湖泊水100kg；培养方式：搅拌培养15天，直至pH降到3-4；好氧异养细菌菌群富集培养基各组分、配比及培养方式如下：红糖5.0kg，尿素0.25kg，奶粉0.125kg，酵母浸膏0.8kg，EDTA0.5g，CoSO40.1g，河道湖泊水100kg；培养方式：曝气至溶氧保持4mgl以上，加碳酸钙使pH保持7-7.3，培养3-5天；步骤（2）中，底泥中硝化细菌菌群经富集培养基一次培养后，还进行絮凝沉淀浓缩，即加入PAM絮凝剂，沉淀浓缩硝化细菌菌群，得到浓缩液；并将此浓缩液作为硝化细菌菌群第一原种；步骤（3）中，硝化细菌菌群第一原种经富集培养基二次培养后，还进行絮凝沉淀浓缩，即加入PAM絮凝剂，沉淀浓缩硝化细菌菌群，得到浓缩液；并将此浓缩液作为硝化细菌菌群第二原种；步骤（4）中，硝化细菌菌群扩大培养基各组分、配比及培养方式如下：NH42SO450g，NaNO21g，MgSO4·7H2O50g，MnSO4·4H2O1g，CoSO40.1g，FeSO4·7H2O4g，K2HPO4150g，CaCO3500g，河道湖泊水100kg；培养方式：曝气至溶氧保持4mgl以上，加碳酸钙使pH保持7-8，培养3-7天；步骤（4）中，反硝化细菌菌群扩大培养基各组分、配比及培养方式如下：红糖5.0kg，尿素0.4kg，奶粉0.15kg，酵母浸膏1.0kg，EDTA0.5g，CaNO32·4H2O500g，CoSO40.1g，河道湖泊水100kg；培养方式：搅拌培养10-20天；步骤（4）中，好氧异养细菌菌群扩大培养基各组分、配比及培养方式如下：红糖5.0kg；尿素0.4kg；奶粉0.15kg；酵母浸膏1.0kg；EDTA0.5g；CoSO40.1g；河道湖泊水100kg；培养方式：曝气至溶氧保持4mgl以上，调节pH至7-7.3，培养3-10天。

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