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申请/专利权人：江南大学;南京汉欣医药科技有限公司
摘要：本发明公开了一种肝素N‑磺基转移酶突变体构建方法，属于生物工程技术领域。本发明对人源的双功能酶NCBIReferenceSequence:NP_001534.1中的硫酸乙酰肝素N‑磺基转移酶1进行了改造，通过截短、单点突变、多点组合突变等生物技术手段，获得了能够使得稳定性和催化效率显著提升的肝素N‑磺基转移酶突变体。本发明提供的人源肝素N‑磺基转移酶突变体催化效率比人源肝素N‑磺基转移酶原始菌株提高了1.3倍，且在37℃下的稳定性也较野生型有显著提升，更有利于长时间催化获得高转化率的N‑磺酸化肝素前体。
主权项：1.一种肝素N-磺基转移酶突变体，其特征在于，所述肝素N-磺基转移酶突变体为（a）或（b）：（a）将人源肝素N-磺基转移酶的第637位的丝氨酸突变为脯氨酸；（b）将人源肝素N-磺基转移酶的N端敲除前4个氨基酸、第637位的丝氨酸突变为脯氨酸、第741位的丝氨酸突变为脯氨酸、第839位的谷氨酸突变为脯氨酸、第842位的亮氨酸突变为脯氨酸、第779位的赖氨酸突变为天冬酰胺和第782位的精氨酸突变为缬氨酸；所述人源肝素N-磺基转移酶的氨基酸序列如NCBIReferenceSequence:NP_001534.1的双功能酶的第599位的赖氨酸至第882的精氨酸所示。
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百度查询： 江南大学 南京汉欣医药科技有限公司 一种肝素N-磺基转移酶突变体构建方法
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