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申请/专利权人:四川农业大学
摘要:本发明提供了一种猕猴桃AcVB病毒的多克隆抗体及其制备方法和应用,该AcVB病毒的多克隆抗体的制备方法主要是采用相关引物扩增出AcVB‑CP基因片段,然后将AcVB‑CP基因片段连接到表达载体上,然后对其进行表达,获得重组蛋白,然后采用该重组蛋白免疫大白兔,制备抗体。将该抗体制备成检测试剂盒或者检测试纸等产品,可准确、方便、灵敏、快捷、经济地检测出猕猴桃的患病情况,适合于对大量样本的检测。
主权项:1.一种猕猴桃AcVB外壳蛋白的多克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)获取患AcVB病猕猴桃总RNA;(2)以总RNA为模板,采用AcVB-F2R2引物扩增猕猴桃AcVB外壳蛋白基因的全基因片段,然后以猕猴桃AcVB外壳蛋白全基因片段为模板,采用AcVB-F3R3引物扩增猕猴桃AcVB外壳蛋白目标基因片段;其中,AcVB-F2R2引物的核苷酸序列分别如下所示:AcVB-F2引物为:5’-GTTATGCCAAACGTTTATGATGC-3’,AcVB-R2引物为:5’-TAGAGCGTCTCACTATCAGTTACTC-3’;AcVB-F3R3引物的核苷酸序列分别如下所示:AcVB-F3引物为:5’-ATGTCAGGAGCTACATCAAGG-3’,AcVB-R3引物为:5’-CTATATCTCAACAGCTTGTTCGC-3’;(3)将猕猴桃AcVB外壳蛋白目标基因片段连接到表达载体上,获得重组载体,然后将重组载体转化大肠杆菌,诱导蛋白表达和纯化,得到重组蛋白;(4)以重组蛋白免疫大白兔,制备获得猕猴桃AcVB外壳蛋白的多克隆抗体。
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百度查询: 四川农业大学 一种猕猴桃AcVB病毒的多克隆抗体及其制备方法和应用
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