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申请/专利权人：昆明理工大学
摘要：本发明涉及干细胞或类胚胎技术领域，尤其涉及培养基及用其诱导分化胚外内胚层和胚外中胚层的方法。本发明开发了一种新的诱导培养基，并利用该培养基提供了一种体外高效诱导NaivehPSCs分化胚外内胚层和胚外中胚层细胞的方法。本发明能够快速4天内高效诱导NaivehPSCs分化为胚外内胚层和胚外中胚层细胞。在胚外内胚层的分化条件下，胚外内胚层细胞的比例能够超过60％；在胚外中胚层的分化条件下，胚外中胚层细胞的比例几乎100％。本发明为胚外谱系的发育动态和发育原理的研究提供了新的细胞模型，本发明在再生医学领域和医美行业具有广阔的应用前景。
主权项：1.一种体外诱导分化胚外内胚层细胞的方法，其特征在于，包括：用50％TrypLE将NaivehPSCs消化为单细胞，离心去上清，用XENExM分化培养基重悬细胞并计数，以1×104细胞cm2的细胞密度接种至Feeder上，CO2培养箱培养48小时；48小时后改变培养基，从XENExM分化培养基中去除CHIR99021和人骨形态发生蛋白4，继续培养至96小时；96小时后，超过60％的细胞为胚外内胚层细胞；所述XENExM分化培养基包括mN2B27培养基、以及5-50ngml重组人成纤维细胞生长因子4、0.5-2μgml肝素钠、2-10μΜY27632、1-3μΜCHIR99021、1-10ngml人骨形态发生蛋白4；所述mN2B27培养基包括：基础培养基、以及0.25-1％N2、0.5-2％B27、0.1-1％GlutaMAX、0.1-1％非必需氨基酸、0.01-0.1mMβ-巯基乙醇、1-100μgml左旋抗坏血酸-2-磷酸镁盐、0.05-0.2％化学脂质浓缩液、1-20μgml胰岛素、0.01-0.05μgml黄体酮；所述基础培养基为DMEMF12培养基与Neurobasal培养基的混合培养基。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 昆明理工大学 培养基及用其诱导分化胚外内胚层和胚外中胚层的方法
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