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一种绵羊早期胚胎来源的脂肪间充质干细胞的分离、体外培养及鉴定 

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申请/专利权人:石河子大学

摘要:本发明公开了一种绵羊早期胚胎来源的脂肪间充质干细胞的分离、体外培养及鉴定,涉及干细胞培养技术领域。通过分离胎龄为70‑75天的脂尾(臀)型绵羊尾(臀)部脂肪组织,胰酶消化和组织贴壁结合的方法分离出脂肪间充质干细胞,使用成分简单细胞培养液进行培养,为初学者提供了一种简便高效的脂肪间充质干细胞培养方法。该方法具有取材来源广,操作简单、快速、重复性高和分离细胞活性好干性强的特点,且6天内就可进行传代培养,达到短期快速获得大量脂肪间充质干细胞的目的,培养出的脂肪间充质干细胞还可以连续传代。为研究绵羊脂肪沉积机制提供了良好的试验材料,且可以用于调控脂肪发育和代谢,以及与其相关的生理和病理过程。

主权项:1.一种绵羊早期胚胎来源脂肪间充质干细胞的分离培养和鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:S1细胞培养液的配置:高糖DMEM、10%胎牛血清和1%双抗;S2绵羊早期胚胎来源脂肪间充质干细胞的分离培养:分离胎龄为70-75天的脂尾(臀)型绵羊尾(臀)部脂肪组织,采用胰酶消化法和组织贴壁法结合方法,胰酶消化后,使用胰酶两倍体积的细胞培养液终止消化,得到的组织块与脂肪间充质干细胞一同铺于6mm大小细胞培养皿中,进行纯化培养;S3脂肪间充质干细胞的鉴定:使用RT-qPCR与琼脂糖凝胶电泳结合,以及免疫荧光鉴定细胞类型,使用成脂诱导液和成骨诱导液分别诱导传至第五代脂肪间充质干细胞,鉴定细胞干性。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 石河子大学 一种绵羊早期胚胎来源的脂肪间充质干细胞的分离、体外培养及鉴定

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