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一种用于生产甘精胰岛素的培养基 

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申请/专利权人:鲁南制药集团股份有限公司

摘要:本发明属于发酵工程领域,具体涉及一种用于生产甘精胰岛素的培养基,公开了其培养基配方及发酵过程各控制参数,其基础培养基包含酵母提取物8~15gL,酵母蛋白胨15~20gL,甘油10~30gL,柠檬酸1~5gL,磷酸氢二胺2~10gL,磷酸二氢钾5~20gL,硫酸镁0.2~2gL,氯化钠0.2~2gL,微量元素0.4~0.6mlL。本发明通过优化基础培养基与补料培养基组成、控制发酵条件,分段控制发酵诱导前后的pH值,获得高产甘精胰岛素的同时将质粒丢失率控制在4%以内,电泳表达量在45%以上。本发明的甘精胰岛素高密度发酵提高了生产效率,具有很好的应用前景。

主权项:1.一种用于生产甘精胰岛素的发酵方法,其特征在于,包括如下步骤:a、将工程菌菌种在种子培养基中逐级放大培养,获得种子液;b、种子液接种至发酵罐基础培养基中进行高密度培养,溶氧达90%以上并且pH上升时,进行第一次流加补料培养基;加入诱导剂诱导后进行第二次流加补料培养基;发酵期间分段控制发酵诱导前后的pH值,至培养结束;其中,发酵期间诱导前pH值为6.5~6.9,诱导后pH值为7.1~7.5;所述基础培养基组成为: 组分 浓度gL 组分 浓度mgL 酵母提取物 8~15 硫酸亚铁 4~12 酵母蛋白胨 15~20 硫酸钴 4~12 甘油 10~30 氯化铜 0.08~0.6 柠檬酸 1~5 氯化钙 2~9 磷酸氢二胺 2~10 氯化锌 0.2~1.5 磷酸二氢钾 5~20 硼酸 0.08~0.6 硫酸镁 0.2~2 硫酸锰 0.08~0.6 氯化钠 0.2~2 — — 所述基础培养基pH值为6.5~6.9,所述工程菌菌种参照专利CN1663960B构建。

全文数据:

权利要求:

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