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申请/专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
摘要：本发明属于微生物基因工程与代谢工程应用领域，具体涉及一种利用甲醇生产红没药烯的重组巴斯德毕赤酵母及其构建方法和应用。将来源于冷杉的红没药烯合酶基因AgBIS整合至毕赤酵母基因组，可以进行以甲醇为唯一碳源的红没药烯发酵。在此基础上，进一步进行改造获得不同重组菌株；以甲醇最小培养基进行发酵，甲醇转化合成红没药烯最终产量达到266mgL。通过在过氧化物酶体重构MVA途径，甲醇转化生产红没药烯最终产量达到133mgL。本发明首次实现毕赤巴斯德酵母红没药烯合成，特别是甲醇到红没药烯的高效生物合成，拓展甲醇绿色转化路径，并且发掘巴斯德毕赤酵母在甲醇生物转化领域的应用潜力。
主权项：1.一种产红没药烯的重组巴斯德毕赤酵母菌株的构建方法，其特征在于：将来源于冷杉的红没药烯合酶基因AgBIS整合至毕赤酵母基因组，即获得重组菌株；或，在上述获得重组菌株中过表达羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶KpHmgr，法尼基焦磷酸合酶KpFpps，乙酰乙酰辅酶A转移酶KpErg10，3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶KpHmgs，甲羟戊酸激酶KpMk，磷酸甲羟戊酸激酶KpPmk，Cas蛋白，红没药烯合酶与法尼基焦磷酸合酶融合蛋白KpFppsGGGSAgBis，回补HIS4基因后进而获得重组菌株；或，在毕赤酵母菌株过氧化物酶体中过表达来源于冷杉的基因AgBIS编码的红没药烯合酶、由基因HMGR编码的羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶、由基因FPPS编码的法尼基焦磷酸合酶、由基因ERG10编码的乙酰乙酰辅酶A转移酶、由基因HMGS编码的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶、由基因PMD编码的磷酸甲羟戊酸脱羧酶、由基因IDI编码的IPP异构酶、由基因MK编码的甲羟戊酸激酶、由基因PMK编码的磷酸甲羟戊酸激酶、由基因AgBIS编码的红没药烯合酶与KpFPPS编码的法尼基焦磷酸合酶融合蛋白、由基因EfmvaE编码的双功能乙酰基辅酶A硫醇酶、由基因EfmvaS编码的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶，且回补HIS4基因。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国科学院大连化学物理研究所 一种重组巴斯德毕赤酵母菌株、其构建方法和应用
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