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申请/专利权人：陕西理工大学
摘要：本发明公开一种VGLL3trunc蛋白及其卵黄抗体（IgY）的制备方法及其应用，步骤如下：采用基因重组法制备VGLL3的截短蛋白VGLL3trunc作为抗原；对抗原进行乳化后选取健康的蛋鸡进行注射免疫；从经免疫的蛋鸡的鸡蛋中提取IgY抗体。本发明利用基因工程的方法构建含有VGLL3trunc蛋白的表达质粒，在BL21DE3大肠杆菌中进行表达，经分离纯化得到表达产物作为抗原，与弗氏佐剂混合乳化后免疫蛋鸡，收集鸡蛋并提取蛋黄中IgY抗体。经验证，该卵黄抗体可以有效结合VGLL3trunc蛋白，效价最高可达1：5000，并能特异性识别VGLL3蛋白。
主权项：1.一种VGLL3trunc蛋白及其卵黄抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）采用基因重组法制备VGLL3的截短VGLL3trunc蛋白作为抗原；（2）对步骤（1）中制备的抗原进行乳化：将上述抗原用弗氏完全佐剂按1:1混合后乳化作为初次免疫抗原；将弗氏不完全佐剂与上述抗原按1:1混合乳化后作为加强免疫抗原；（3）免疫：将健康的产蛋母鸡隔离饲养，采用肌肉多点注射步骤（2）中的初次免疫抗原，初次免疫后，每隔两周进行一次加强免疫，共进行三次加强免疫，加强免疫使用步骤（2）中的加强免疫抗原；从初次免疫后计算，第21天开始收集鸡蛋，该鸡蛋中含有抗VGLL3trunc蛋白的特异性IgY抗体，将鸡蛋4℃存储备用；（4）从上述鸡蛋中提取抗VGLL3trunc蛋白的特异性IgY抗体，提取方法使用PEG6000沉淀法。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 陕西理工大学 一种VGLL3trunc蛋白及其卵黄抗体的制备方法
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