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申请/专利权人：安徽中医药大学

摘要：本发明提供了一种穿心莲二萜内酯类化合物及其提取方法和应用，属于中医药技术领域。本发明提供的穿心莲二萜内酯类化合物具有式1～式7任一所示结构，结构新颖。本发明从穿心莲中提取分离得到的穿心莲二萜内酯类化合物具有良好的抗炎效果，且对脂多糖LPS诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞炎症模型中NO、白细胞介素‑6IL‑6、肿瘤坏死因子‑αTNF‑α和白细胞介素‑1βIL‑1β分泌具有很好的下调作用，还对诱导型一氧化氮合成酶iNOS和环氧合酶‑2COX‑2蛋白的表达具有良好的抑制作用，可在制备抗炎药物中应用。

主权项：1.一种穿心莲二萜内酯类化合物的提取方法，包括以下步骤：所述穿心莲二萜内酯类化合物具有式1～式7任一所示结构： 式1～式6所示结构的穿心莲二萜内酯类化合物的提取方法包括以下步骤：采用第一溶剂对穿心莲进行提取，得到提取液；去除所述提取液中的溶剂，得到第一浸膏；所述第一溶剂选自甲醇水溶液或丙酮；将所述第一浸膏与水混悬，采用石油醚进行萃取，收集水萃取液；去除所述水萃取液中的溶剂，得到第二浸膏；将所述第二浸膏与甲醇混合后依次进行第一硅胶柱层析分离和第二硅胶柱层析分离，分别得到第一混合物和第二混合物；所述第一硅胶柱层析分离和第二硅胶柱层析分离所用流动相独立为二氯甲烷和甲醇的混合液；所述第一硅胶柱层析分离为梯度洗脱，所述第一硅胶柱层析分离所用二氯甲烷和甲醇的体积比为50～1：1；所述第二硅胶柱层析分离为梯度洗脱，所述第二硅胶柱层析分离所用二氯甲烷和甲醇的体积比为20～1：1；将所述第一混合物依次进行第一反相色谱分离、第二反相色谱分离和第三反相色谱分离，得到第三混合物；所述第一反相色谱分离、第二反相色谱分离和第三反相色谱分离所用流动相独立地由流动相A和流动相B组成，所述流动相A为甲醇，所述流动相B为水；所述第一反相色谱分离、第二反相色谱分离和第三反相色谱分离所用色谱柱为ODS色谱柱；所述第一反相色谱分离、第二反相色谱分离和第三反相色谱分离的洗脱方式为梯度洗脱；所述第一反相色谱分离的梯度洗脱程序为：0.00～2.00h，流动相A的体积分数保持为40％；2.00～2.01h，流动相A的体积分数从40％匀速增至60％；2.01～4.00h，流动相A的体积分数保持为60％；4.00～4.01h，流动相A的体积分数从60％匀速增至80％；4.01～5.50h，流动相A的体积分数为80％；5.50～5.51h，流动相A的体积分数从80％匀速增至100％；5.51～6.00h，流动相A的体积分数保持为100％；所述第二反相色谱分离和第三反相色谱分离的梯度洗脱程序为：0.00～2.00h，流动相A的体积分数保持为0％；2.00～2.01h，流动相A的体积分数从0％匀速增至60％；2.01～4.00h，流动相A的体积分数保持为60％；4.00～4.01h，流动相A的体积分数从60％匀速增至80％；4.01～5.50h，流动相A的体积分数为80％；5.50～5.51h，流动相A的体积分数从80％匀速增至100％；5.51～6.00h，流动相A的体积分数保持为100％；将所述第三混合物进行第一高效液相色谱分离，分别得到具有式1、式2、式3、式4、式5和式6所示结构的穿心莲二萜内酯类化合物；所述第一高效液相色谱分离所用流动相由流动相A和流动相B组成，所述流动相A为乙腈，所述流动相B为水；所述第一高效液相色谱分离所用色谱柱为反相C18硅胶基质色谱柱；所述第一高效液相色谱分离所用流动相中乙腈的体积分数为25～40％；所述第一高效液相色谱分离的洗脱方式为等度洗脱；式7所示结构的穿心莲二萜内酯类化合物的提取方法包括以下步骤：将所述第二混合物进行重结晶，得到第四混合物；将所述第四混合物进行第二高效液相色谱分离，得到具有式7所示结构的穿心莲二萜内酯类化合物；所述第二高效液相色谱分离所用流动相为乙腈和水的混合液；所述第二高效液相色谱分离所用色谱柱为反相C18硅胶基质色谱柱；所述第二高效液相色谱分离所用流动相中乙腈的体积分数为35～40％；所述第二高效液相色谱分离的洗脱方式为等度洗脱。

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百度查询： 安徽中医药大学 一种穿心莲二萜内酯类化合物及其提取方法和应用