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申请/专利权人:唐传生物科技(厦门)有限公司
摘要:本发明涉及一种用于单糖分析的高效液相法。具体地,本发明提供一种用于测定单糖的HPLC方法。本发明所述的方法能够同时对多种单糖进行定性和定量测定。
主权项:1.一种用于测定单糖的HPLC方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:1通过高效液相对样品中的单糖进行测定;所述的高效液相的色谱条件为:色谱柱:反相色谱柱,所述的反相色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱;流动相:流动相A和流动相B,所述的流动相A包括10.3-11.0重量份的四硼酸钾四水合物、4.5-5.5重量份硼酸和1000-1150重量份的水;所述的流动相B包括乙腈;和流动相洗脱:所述的流动相洗脱为梯度洗脱,所述的梯度洗脱的顺序为: 时间min 流动相Avv% 流动相Bvv% 0 90 10 40 50 50 51 90 10 其中,vv%是指占流动相的体积分数,其中,0-40min时,流动相A的体积分数从90%匀速下降到50%,流动相B的体积分数为从10%匀速上升到50%;40-51min时,流动相A的体积分数从50%匀速上升到90%,流动相B的体积分数为从50%匀速下降到10%;所述的单糖包括葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖、核糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖和2-脱氧-D-核糖;所述的步骤1包括:先用衍生化试剂对样品中的单糖进行衍生化,得到含有衍生化的单糖的样品后,然后进样HPLC,从而测定单糖;所述的衍生化试剂包括0.1-4重量份氰基硼氢钠、0.4-9重量份4-氨基苯甲酸乙酯、0.1-2重量份硼酸、2-15重量份醋酸和40-50重量份甲醇。
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