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申请/专利权人:天津凯莱英生物科技有限公司;凯莱英医药集团(天津)股份有限公司
摘要:本发明提供了一种可溶性表达质粒突变体库的构建方法及其应用。其中,可溶性表达质粒突变体库的构建方法包括:对可溶性表达质粒上的核糖体结合位点、核糖体结合位点与待表达的融合蛋白起始密码子之间的序列组成及长度、以及翻译起始区进行突变,获得突变体库。这种方法通过获得表达量提升的质粒突变体,进而提升目标融合蛋白的表达量和最终的目标多肽的产量。解决了某些多肽在大肠杆菌中可溶性表达量低的问题。
主权项:1.一种可溶性表达质粒突变体库的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括:采用SEQIDNO:71和SEQIDNO:11对可溶性表达质粒上的核糖体结合位点、所述核糖体结合位点与待表达的融合蛋白的起始密码子之间的序列组成及长度、以及翻译起始区进行突变,获得所述突变体库;待表达的所述融合蛋白按照从N端到C端的方向包括所述Sumo标签以及直接连接在所述Sumo标签的C端的GLP-1前体;在所述突变体库中的所述可溶性质粒上的核糖体结合位点、所述核糖体结合位点与待表达的所述融合蛋白的起始密码子之间的序列组成及长度、以及翻译起始区含有如下任意一种突变序列:1)SEQIDNO:7:GAGGAAGAAGTAGAATGCATCATCACCATCATCATGGCTCG;2)SEQIDNO:8:GGAAAGAGTAATTAATGCATCATCATCATCACCATGGTTCA;3)SEQIDNO:9:AAAGAGAGTTAAGTATGCATCATCATCATCATCACGGATCT。
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百度查询: 天津凯莱英生物科技有限公司 凯莱英医药集团(天津)股份有限公司 可溶性表达质粒突变体库的构建方法及其应用
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