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申请/专利权人:内蒙古驰影医疗设备有限公司;广西大学
摘要:本发明公开了一种Nav1.8重组质粒、异源表达系统及构建方法和应用。一种用于电压门控钠离子通道Nav1.8异源表达的重组质粒的构建方法包括以下步骤:1)将从背根神经节中提取的总RNA反转录为cDNA;2)以cDNA为模板,通过第一引物、第二引物对Nav1.8进行基因扩增,得到Nav1.8目的基因;3)以步骤2)的Nav1.8目的基因为模板,在该目的基因两端添加同源臂,得到带有同源臂的Nav1.8目的基因;4)将步骤3)的带有同源臂的Nav1.8目的基因和线性化载体进行同源重组,得到同源重组产物;将同源重组产物转化至大肠杆菌中,得到重组质粒。本发明的重组质粒可以在蛙卵中实现异源表达。
主权项:1.一种用于电压门控钠离子通道Nav1.8异源表达的重组质粒的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将从背根神经节中提取的总RNA反转录为cDNA;2)以cDNA为模板,通过第一引物、第二引物对Nav1.8进行基因扩增,得到Nav1.8目的基因;3)以步骤2)的Nav1.8目的基因为模板,在该目的基因两端添加同源臂,得到带有同源臂的Nav1.8目的基因;4)将步骤3)的带有同源臂的Nav1.8目的基因和线性化载体进行同源重组,得到同源重组产物;将同源重组产物转化至大肠杆菌中,得到重组质粒;其中,所述第一引物的序列如SEQIDNO:1所示;所述第二引物的序列如SEQIDNO:2所示。
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百度查询: 内蒙古驰影医疗设备有限公司 广西大学 Nav1.8重组质粒、异源表达系统及构建方法和应用
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