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申请/专利权人:临沂大学;临沂金锣文瑞食品有限公司
摘要:本发明公开了一种基于GC‑MS检测动物肠道食糜或粪便中戊酸的方法,属于内源性物质检测技术领域,包括以下步骤:食糜或粪便样品前处理:将事先采好的结肠、盲肠食糜或粪便样品解冻,搅拌混匀,均匀称取适量样品于离心管,加入适量超纯水,涡旋混匀并静置一定时间,静置后离心一定时间,再加入检测溶液,混匀后孵育一定时间再进行离心,离心加入一定量的色谱甲醇,涡旋混匀在离心一定时间,过滤一定的溶液至EP管中;气相色谱测定;结果与分析。该基于GC‑MS检测动物肠道食糜或粪便中戊酸的方法,可以整体诊断体内厌氧菌的变化,对营养、微生物和环境的研究有重要意义。
主权项:1.一种基于GC-MS检测动物肠道食糜或粪便中戊酸的方法,包括,其特征在于:包括以下步骤:步骤1、食糜或粪便样品前处理:将事先采好的结肠、盲肠食糜或粪便样品解冻,搅拌混匀,均匀称取适量样品于离心管,加入1.5mlV0超纯水,涡旋混匀并静置30分钟,静置后10000xg离心15分钟,取1mlV1上清加入0.2mlV225%WV偏磷酸溶液、23.3ulV3210mmolL巴豆酸溶液,混匀后4℃放置孵育30分钟,之后8000xg高心分钟,离心后取0.3mlV4上清加入0.9mlV5色谱甲醇,涡旋混匀,8000xg离心5分钟,取上清用0.22μm针式过滤器过滤至1.5mlEP管中,上机检测。步骤2、气相色谱测定:取步骤1所得样本进行GC-MS检测:色谱条件:进样口温度220℃,进样量1μL,分流比50:1;载气为高纯N2,柱流量1mlmin;FID检测器温度250℃,燃气高纯H2流量40mlmin,助燃气零级空气流量400mlmin,尾吹气高纯N2流量35mlmin,色谱柱HP-FFAP,柱温箱程序升温:起始温度100℃,以20℃min的速度升温至190℃,保持0.5分钟,运行时间5分钟。步骤3、结果与分析:对步骤2所得的数据进行方法学验证,进行线性、检测限、重现性和加标回收率测定,并对结果进行分析。
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百度查询: 临沂大学 临沂金锣文瑞食品有限公司 一种基于GC-MS检测动物肠道食糜或粪便中戊酸的方法
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