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申请/专利权人：南开大学
摘要：本发明提供了一种超滤管辅助酶解及加热潮解除盐的蛋白组学前处理方法，包括如下步骤：将待测蛋白质溶液使用超滤管进行超滤，使蛋白质截留在超滤管内，向超滤管中加入碳酸氢铵缓冲液，将超滤管中的蛋白质溶液置换为碳酸氢铵缓冲液，然后加入蛋白酶，酶解后收集滤液，将滤液加热后即得到多肽样品。本发明所述的超滤管辅助酶解及加热潮解除盐的蛋白组学前处理方法利用超滤管截流蛋白，将酶解的缓冲液置换成碳酸氢铵水溶液，酶解后利用碳酸氢铵加热潮解的特性除去多肽溶液中的碳酸氢铵成分，最终得到纯净的多肽，可以方便地与LC‑MS衔接，进行质谱分析。与传统的方法相比，无样品损失，提高了蛋白质检测数目，同时操作简单快捷。
主权项：1.一种超滤管辅助酶解及加热潮解除盐的蛋白组学前处理方法，其特征在于：包括如下步骤：将待测蛋白质溶液使用超滤管进行超滤，使蛋白质截留在超滤管内，向超滤管中加入碳酸氢铵缓冲液，将超滤管中的蛋白质溶液置换为碳酸氢铵缓冲液，然后加入蛋白酶，酶解后收集滤液，将滤液加热后即得到多肽样品；酶解后的多肽样品通过真空离心浓缩或干燥，之后进行加热除盐；通过真空离心干燥样品：真空离心干燥机腔温度大于等于37℃；所述的超滤管的滤膜孔径为10-50KD；所述的碳酸氢铵缓冲液为浓度为50-100mM碳酸氢铵水溶液；所述的碳酸氢铵缓冲液中包含有浓度为0.002-0.1%的蛋白酶增强剂；所述的蛋白酶增强剂为ProteaseMAX™Surfactant。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南开大学 超滤管辅助酶解及加热潮解除盐的蛋白组学前处理方法
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