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申请/专利权人：西南大学

摘要：本发明公开了一种对凝胶中核酸和蛋白质进行染色分析的新方法，涉及分析化学技术领域，其技术方案要点是：利用氯金酸溶液、新制聚丙烯酰胺凝胶，通过还原法在聚丙烯酰胺凝胶内部制备金纳米粒子实现凝胶染色。利用核酸碱基、蛋白质与金纳米颗粒表面的相互作用调控金纳米粒子生长，通过凝胶颜色深浅变化对凝胶中核酸和蛋白质进行成像。该方法操作简单，具有较高的灵敏度和重现性，是一种更安全、便宜且便捷的二维凝胶染色分析方法。

主权项：1.一种对凝胶中核酸和蛋白质进行染色分析的方法，该方法包括对经电泳分离核酸和蛋白质处理后的聚丙烯酰胺凝胶染色，其特征是：包括如下步骤：S1：制备聚丙烯酰胺凝胶、核酸进样液、蛋白质进样液，准备四氯金酸溶液；S2：对水浴锅和气浴摇床进行预加热，设置加热温度为60℃；S3：对一块聚丙烯酰胺凝胶泳道从左至右分别进行编号1-1、1-2、1-3、1-4、1-5、1-6、1-7和1-8，另一块聚丙烯酰胺凝胶泳道从左至右分别进行编号2-1、2-2、2-3、2-4、2-5、2-6和2-7，使用微量进样器向所述1-2～1-7和2-2～2-7泳道中分别依次加入18μL浓度均为3.0μM的DNA-21进样液、DNA-141进样液、RNA-21进样液、RNA-141进样液、双链DNA-RNA-21进样液和双链DNA-RNA-141进样液，向所述1-8泳道中加入18μL浓度为3.0mgmL的牛血清白蛋白进样液，进行电泳分离处理，设置恒定电流10mA，电泳5min，再设置恒定电压120V，电泳80min；S4：取两个染缸分别编号1、2，均装入8mL四氯金酸溶液并置于装有60℃热水的水浴锅中预加热3min，将电泳处理后1-1～1-7核酸条带、1-8蛋白质条带所对应位置的凝胶分别裁成两片宽为2cm的长方形凝胶片，将2-1～2-7处核酸条带均裁成宽为2cm的长方形凝胶片；将所述1-1～1-7泳道核酸凝胶片和1-8蛋白质凝胶片放入染缸1，将所述2-1～2-7泳道核酸凝胶片先放入凝胶红荧光染料中浸泡20min再放入染缸2。S5：将步骤S4中所述的两个染缸放入步骤S1所述气浴摇床中金染，设置温度60℃，转速75rpm，染色40min后取出观察核酸和蛋白质条带。

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