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一种快速网织红细胞染色试剂及其应用 

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申请/专利权人:湖南伊鸿健康科技有限公司

摘要:本发明公开了一种快速网织红细胞染色试剂及其应用,是一种稳定性好、染色效率高、分类特征明显、仅用一种液体试剂就能对网织红进行快速染色的方法,且不受稀释倍数的限制,该试剂能裂解绝大部分正常红细胞,网织红细胞的特征突出;使其能够适用于基于机器视觉原理、以细胞形态学分析技术对样品中网织红细胞进行自动识别与分类计数,保证检测结果的准确性;红细胞无需固定洗脱处于悬浮状态下的一种染色方法,能在明场实现对网织红细胞的识别。

主权项:1.一种快速网织红细胞染色试剂,其特征在于:包括调节盐、穿膜剂、固定剂、抗凝剂、防腐剂、染色剂,染色24h后细胞形态仍如即时染色的效果,不会褪色或者染色程度加深导致无法辨别;试剂中各成分和浓度为如下:调节盐,选自磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液中的一种,浓度为0.01-0.1M,pH为7.0-8.0;调节盐中还添加NaCl或KCl,浓度为0.01-2gL;穿膜剂,选自洋地黄皂苷,或者TritonX-100、NP-40和Brij-58非离子型表面活性剂中的一种,穿膜剂浓度为2-6gL;固定剂,选自海藻糖,浓度为10-20gL;抗凝剂,选自EDTA盐,包括EDTA2K、EDTA3K、EDTA2Na中的一种,浓度为2-10mM;防腐剂,选自ProClin950或ProClin300;染色剂,选自新亚甲蓝、灿烂甲酚蓝核酸结合染料中的一种,浓度为0.1-0.5gL;所述的快速网织红细胞染色试剂的配制方法:依次称取调节盐、穿膜剂、固定剂、抗凝剂、防腐剂置于烧杯中,加入超纯水,最后加入染色剂搅拌至完全溶解,过滤后即可使用。

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