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用于EM连接组学的小鼠全脑和人脑样本高对比度整体染色 

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申请/专利权人:马克思—普朗克科学促进协会公司

摘要:人类皮层灰质连接组需要高对比度均匀染色的、每边至少2‑3mm的样本,而小鼠全脑连接组需要每边至少5‑10mm的样本。本文报告了整体染色和后处理方案,包括神经元样本的脱水和包埋,用于密集神经元回路重建和其他应用。

主权项:1.一种对生物组织样本进行染色的方法,包括以下步骤:a将样本在含有1至3%、优选1.5至2.5%、更优选1.8至2.2%、甚至更优选2%重金属化合物的缓冲水溶液中孵育,b在缓冲水溶液中清洗样本,c将样本在含有1.5至3.5%、优选2至3%、更优选2.2至2.75%、甚至更优选2.5%还原剂的缓冲水溶液中孵育,d重复步骤b,e重复步骤a,f重复步骤b,g在水中清洗样本,h将样本在含有2.5至5.5%、优选3至5%、更优选3.5至4.5%、甚至更优选4%染色放大剂,优选1,2,3-三羟基苯的水溶液中孵育,i重复步骤g,j重复步骤a,其中所述重金属化合物溶解在水溶液中,k重复步骤g,l将样本在含有3至5%、优选3.5至4.5%、更优选3.75至4.25%、甚至更优选4%重金属化合物的水溶液中孵育,其中所述重金属化合物不同于步骤a中的重金属化合物,m进一步孵育步骤l中的样本,其中温度升高到至少35℃,和n重复步骤g。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 马克思—普朗克科学促进协会公司 用于EM连接组学的小鼠全脑和人脑样本高对比度整体染色

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