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申请/专利权人：烟台东诚药业集团股份有限公司
摘要：本发明公布了一种达肝素钠寡糖检测的新方法，属于多组分生化原料药分析技术领域。目的在于利用较少的操作步骤及较简单的流动相分离达肝素钠中的四糖及六糖，用于达肝素钠的精细结构对比。开发出的方法包括如下几个步骤：（1）供试品溶液的制备、（2）分子排阻色谱分离、（3）样品浓缩、（4）阴离子交换‑高效液相色谱分离。本发明与现有分离方法相比，其优点在于：操作简单，分子排阻色谱法分离得到的寡糖纯度高；进一步采用阴离子交换‑高效液相色谱分离后，可以分离相同链长的不同寡糖。同时本方法既可用于达肝素寡糖链的分析，也可以用于其他低分子肝素寡糖链的分析。
主权项：1.一种达肝素钠寡糖检测的方法，其特征在于，检测方法包含如下步骤：a、取达肝素钠，用水溶解后，用肝素酶I酶解；b、采用分子排阻色谱分离出混合四糖组分及混合六糖组分，色谱条件如下：仪器：AKTA；色谱柱：两根SuperdexTMPeptide10300GL色谱柱串联；流动相：0.2molL碳酸氢铵；洗脱类型：等度洗脱；流速：0.4mlmin；检测波长：232nm；上样量：200μl；收集模式：按体积收集；c、将分离出的混合四糖组分及混合六糖组分采用真空离心浓缩；d、采用阴离子交换-高效液相色谱法分离浓缩后的混合四糖组分及混合六糖组分，以用于结构对比，色谱条件如下：仪器：高效液相色谱仪；色谱柱：WatersSpherisorbS5SAX4.0×250mm；流速：0.45mlmin；柱温：35℃；检测波长：234nm；进样体积：20μl；流动相A：磷酸二氢钠溶液；流动相B：磷酸二氢钠-高氯酸钠溶液；洗脱类型：梯度洗脱，过程如下： 时间min 流动相A％ 流动相B％ 0 55 45 2 55 45 54.5 20 80 64.5 20 80 65 55 45 85 55 45 。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 烟台东诚药业集团股份有限公司 一种达肝素钠寡糖检测的新方法
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