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酶突变体、酶组合物或其固定化酶及其制备虫草素的应用和方法 

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申请/专利权人:华南师范大学

摘要:本发明涉及酶工程领域,特别涉及酶突变体、酶组合物或其固定化酶及其制备虫草素的应用和方法。该方法利用腺苷Adenosine作为起始原料,利用腺苷3’‑激酶Cor3K作用下生成3’‑磷酸腺苷3’‑AMP,然后利用虫草素脱磷酸酶CorDep生成脱水腺苷,最后在虫草素还原酶CorRed转化下生成虫草素。该路线非常简洁,转化率高,所用原料也非常便宜。这个转化可以分步完成,也可以一锅法一次性完成。与此同时,对于第一步和第三步转化所需要用到的辅酶ATP及NADH,还可以引入丙酮酸激酶PcPyk以及甲酸脱氢酶MspFDH进行循环再生,从而进一步降低其生产价格。

主权项:1.酶的突变体,其特征在于,所述酶包括虫草素激酶Cor3K、虫草素脱磷酸酶CorDep、虫草素还原酶CorRed、丙酮酸激酶PcPyK和或甲酸脱氢酶MspFDH中的一种或多种;所述虫草素激酶Cor3K的突变位点包括R13A、M14L、W32T、G35F、D63S、G64M、D65Q、R68I、G70M、N72Y、N73K、I89V、Q157T或K180S中的一个或多个;所述虫草素脱磷酸酶CorDep的突变位点包括K130N、E149D或A175V中的一个或多个;所述虫草素还原酶CorRed的突变位点包括S68M、E69G、E70F、R81V、K89S、P92W、F127N、G128I、T133V、R184A、H187T或N198D中的一个或多个;所述丙酮酸激酶PcPyK的突变位点包括F31I、P99N、G105L、P169M、D248T或W312F中的一个或多个;所述甲酸脱氢酶MspFDH的突变位点包括P12C、Q35T或Y188L中的一个或多个。

全文数据:

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