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申请/专利权人：台州市立医院
摘要：本发明属于免疫检测领域，具体公开了一种人ECRG4免疫微球，以及含有上述微球的检测试剂盒；本发明公开了上述人ECRG4免疫微球的快速高效的制备方法，包括1抗ECRG4多克隆抗体制备、2制备ECRG4蛋白流式检测微球、21微球处理、22免疫微球包被；本方法制备的微球稳定性好，在4℃荧光变化非常小，储存于4℃至少可稳定45天；本发明还公开了利用上述微球对人外周血中ECRG4分子标记蛋白的检测方法，本发明公开的试剂盒相比现有的elisa检测试剂盒具有更好的灵敏度和线性范围。
主权项：1.一种人ECRG4免疫微球，其特征在于，由以下步骤制备：1抗ECRG4多克隆抗体制备基因合成人ECRG4基因表达序列,插入到真核表达质粒pcDNA3.1中，构建成真核表达质粒pcDNA3.1-ECRG4，该质粒肌肉注射免疫家兔，连续免疫若干次，每次间隔时间若干周，免疫完成后若干天，心脏取血，离心分离血清，过亲和层析柱，回收抗ECRG4多克隆抗体；2制备ECRG4蛋白流式检测微球；21微球处理：称取若干微球置于有盖圆底离心管内，加入适量丙酮，混匀封闭后放置摇床过夜，离心，蒸馏水洗，蒸馏水重悬，室温保存；22免疫微球包被：将ECRG4多克隆抗体适量包被缓冲溶液混合，之后加入适量混匀后的微球，置摇床接近冰点温度过夜包被；次日离心后用Tween20PBS洗涤若干次，用适当浓度BSAPBS封闭包被后的微球，置于摇床室温孵育，离心，Tween20PBS洗涤若干次，洗涤后微球用PBS重悬，接近冰点温度保存备用。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 台州市立医院 一种人ECRG4免疫微球检测试剂盒
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