恭喜广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所;岭南现代农业科学与技术广东省实验室河源分中心;广东星汇生物科技有限公司张雁获国家专利权
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龙图腾网恭喜广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所;岭南现代农业科学与技术广东省实验室河源分中心;广东星汇生物科技有限公司申请的专利一种富含抗菌肽与茶皂素的油茶粕提取物及其制备方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117958372B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-18发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311543129.2,技术领域涉及:C07K1/34;该发明授权一种富含抗菌肽与茶皂素的油茶粕提取物及其制备方法和应用是由张雁;邓媛元;唐小俊;刘光;李萍;周鹏飞;赵志浩;曾嘉锐;骆碧群;林江;王佳佳;廖娜设计研发完成,并于2023-11-20向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种富含抗菌肽与茶皂素的油茶粕提取物及其制备方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种富含抗菌肽与茶皂素的油茶粕提取物及其制备方法,该方法采用连续制备的方法,一方面水解油茶粕蛋白获取抗菌肽,另一方面从油茶粕中提取茶皂素,将油茶粕抗菌肽与茶皂素制备物以恰当比例配合,得到富含抗菌肽与茶皂素的油茶粕提取物,该油茶粕提取物富含抗菌肽和茶皂素,集成了油茶粕抗菌肽和茶皂素各自的抑菌优势,对食源性腐败菌具有广谱抑菌活性,可有效抑制食源性腐败菌;该富含抗菌肽与茶皂素的油茶粕提取物可用于制备具有抑制食源性腐败菌作用的产品中。
本发明授权一种富含抗菌肽与茶皂素的油茶粕提取物及其制备方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种富含抗菌肽与茶皂素的油茶粕提取物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:(1)、油茶粕预处理:将油茶粕进行热压、蒸汽爆破及混合酶解预处理;(1.1)热压预处理:以生产茶油的副产物油茶粕为原料,将油茶粕粉碎后置于高压灭菌设备中,在温度115~121℃下进行热压处理15~20min;(1.2)蒸汽爆破预处理:将经过热压预处理的油茶粕粉置于蒸汽爆破设备中,利用饱和水蒸气进行爆破处理,调节蒸汽爆破压强1.2~1.4Mpa,处理时间为40~50s,达到处理时间后,瞬间减压完成物料爆破,得到结构松散的油茶粕粉;(1.3)混合酶解预处理:将结构松散的油茶粕粉置于容器中,加入水,在水-油茶粕体系原始pH值6.0~6.5条件下,加入木聚糖酶、半纤维素酶及纤维素酶,随后置于40~50℃水浴中水解120~150min,得酶解液;(2)、油茶粕预处理完成后,调节酶解液pH值,达到油茶粕蛋白的等电点,使蛋白质的沉淀量最大,完成后进行离心分离,分别收集上清液、蛋白质沉降物,其中,上清液用于提取茶皂素、蛋白质沉降物用于制备油茶粕抗菌肽;(3)、取步骤(2)得到的蛋白质沉降物,加入水并搅匀,调节pH值8.0~8.5,添加含碱性蛋白酶和胰蛋白酶的复合蛋白酶,随后置于40~50℃水浴中水解150~210min,完成复合蛋白酶水解后,进行离心分离,收集上清液,将上清液通过膜分离设备进行膜过滤,膜分离完成后,收集透过液,即得到抗菌肽制备液,经低温真空干燥,得到抗菌肽制备物;(4)、取步骤(2)所得的上清液,加入装有AB-8大孔树脂的层析柱中,待上清液在层析柱中完成吸附后,首先以蒸馏水洗脱吸附在大孔树脂中的可溶性糖,水洗至洗脱液呈中性且经蒽酮-硫酸法检测不存在糖类,随后以低浓度乙醇水溶液洗脱吸附在大孔树脂中的多酚,至洗脱液经福林酚法检测不存在多酚,再以高浓度乙醇水溶液对吸附于大孔树脂中的茶皂素进行洗脱,收集全部茶皂素洗脱液后蒸馏出乙醇,得到茶皂素水提浓缩液,将茶皂素水提浓缩液进行低温真空干燥,得到茶皂素制备物;(5)、分别取步骤(3)得到的抗菌肽制备物与步骤(4)得到的茶皂素制备物,按照其中有效成分抗菌肽与茶皂素的质量份配比为2∶1进行复配并混匀,即得到抑制食源性腐败菌的富含抗菌肽与茶皂素的油茶粕提取物;步骤(1.3)中水的加入量为油茶粕粉总质量的8~12倍,所述木聚糖酶、半纤维素酶及纤维素酶的用量分别为15.0~20.0Ug油茶粕、9.0~12.0Ug油茶粕及5.0~8.0Ug油茶粕;步骤(2)中以0.5~1.0molL的盐酸溶液调节酶解液pH值为4.6,达到油茶粕蛋白的等电点pI4.6;步骤(3)中水的加入量为蛋白质沉降物总质量的8~10倍,以1.0~1.5molL的氢氧化钠溶液调节pH值8.0~8.5,所述复合蛋白酶的添加量为总酶活5500~6000Ug蛋白质沉降物,所述复合蛋白酶中碱性蛋白酶与胰蛋白酶的酶活比为3∶2;步骤(3)中膜过滤参数为:压力1.5~2kgcm2,透过量为30~35mLmin,透过分子量3000Da;步骤(3)中所得抗菌肽制备物,经三氯乙酸沉淀法测定,其中抗菌肽含量达到90%以上,经凝胶色谱法测定,所述抗菌肽制备物以分子量1000Da以下短肽为主,主要是由3~8个氨基酸构成的小肽,小肽含量达到70%以上;步骤(4)中按照上清液体积与AB-8大孔树脂湿树脂质量的比例为25~30mL∶1g添加上清液,上样流速为3.0~4.0mLmin;所述低浓度乙醇水溶液的体积百分含量为20%,所述高浓度乙醇水溶液的体积百分含量为75~85%,所述高浓度乙醇水溶液与所述上清液的体积比为1.5~2:1,所述洗脱液的流速为2.0~3.0mLmin,所述茶皂素制备物,经分光光度法测定,其中茶皂素含量达到90%以上。
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