恭喜武汉原谷生物科技有限责任公司熊雨胜获国家专利权
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龙图腾网恭喜武汉原谷生物科技有限责任公司申请的专利一种固定化蛋白酶Fe3O4磁性纳米粒子的制备方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114381451B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-04发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202111651333.7,技术领域涉及:C12N11/14;该发明授权一种固定化蛋白酶Fe3O4磁性纳米粒子的制备方法及其应用是由熊雨胜;张薇;杜厚明设计研发完成,并于2021-12-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种固定化蛋白酶Fe3O4磁性纳米粒子的制备方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种固定化蛋白酶Fe3O4磁性纳米粒子的制备方法及其应用。其制备方法包括如下步骤:S1、水稻秸秆的改性处理,S2、Fe3O4磁性纳米粒子的改性处理,S3、固定化蛋白酶Fe3O4磁性纳米粒子的制备;本发明首先对Fe3O4磁性纳米粒子进行改性处理,然后将木瓜蛋白酶Papain或胃蛋白酶Pepsin固定在Fe3O4磁性纳米粒子表面,蛋白酶固定在Fe3O4磁性纳米粒子表面后,其催化活性较高,酶解消化完成后,蛋白酶能快速的从消化产物中分离出来,并且蛋白酶和磁性纳米粒子能重复利用,不仅节省了蛋白酶的消耗,而且极大简化了后续酶解产物小片段的纯化工艺,本发明本着资源节约型和环境友好型理念,向改造传统的蛋白酶水解工艺迈出了关键的一步。
本发明授权一种固定化蛋白酶Fe3O4磁性纳米粒子的制备方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种固定化蛋白酶Fe3O4磁性纳米粒子的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、水稻秸秆的改性处理:将水稻秸秆粉碎、过筛、清洗和干燥后,置于真空环境中进行炭化,得到水稻秸秆炭,之后将所述水稻炭溶于水中,并加入植物复合水解酶进行酶解,得到水稻秸秆改性处理液;S2、Fe3O4磁性纳米粒子的改性处理:将步骤S1中制得的水稻秸秆改性处理液与Fe3O4磁性纳米粒子混合,恒温条件下,搅拌均匀,得到混合液,之后将所述混合液均匀滴加到有机溶剂中,得到微球,然后依次用有机溶剂和去离子水充分洗涤微球,最后以微球和壳聚糖季铵盐为原料,采用反相微乳液法制备得到改性Fe3O4磁性纳米粒子,使改性Fe3O4磁性纳米粒子表面带有伯氨基;S3、固定化蛋白酶Fe3O4磁性纳米粒子的制备:将步骤S2中制得的改性Fe3O4磁性纳米粒子加入到含有蛋白酶的缓冲液中,然后依次加入碳化二亚胺、琥珀酰亚胺酯进行共价交联反应,反应结束后,经磁分离得到的产物用PBS缓冲液冲洗,即可制得固定化蛋白酶Fe3O4磁性纳米粒子;步骤S1中,所述炭化的温度为200~250℃,炭化的时间为30~60min,所述植物复合水解酶的添加量为10~20UmL,所述酶解反应的温度为28~37℃,反应的时间为1~2h。
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