恭喜厦门蓝湾科技有限公司赵旭蕊获国家专利权
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龙图腾网恭喜厦门蓝湾科技有限公司申请的专利一种提高磷脂酶D合成PS活性的理性定向进化方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116103264B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-09发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211699169.1,技术领域涉及:C12N9/16;该发明授权一种提高磷脂酶D合成PS活性的理性定向进化方法是由赵旭蕊;林颖珺;林秀芬;张倩;韩尧跃;卢英华设计研发完成,并于2022-12-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种提高磷脂酶D合成PS活性的理性定向进化方法在说明书摘要公布了:本发明涉及生物技术领域,公开了一种提高磷脂酶D合成PS活性的理性定向进化方法,本方案通过文献对比确定ZET4的活性中心,再通过AutoDockVina将PLD2ZE4分别与底物PC和L‑ser进行分子对接,确定底物分子与酶分子的绑定位点,进行蛋白突变设计,对Y135A、Y135I、T181A、T181I、Q387A、Q387I、D392A、D392I和T194I点位进行单点突变或者两组组合突变,其中T181I、Q387A和Q387I构建的突变菌株的PS产率有所提高,由27.46%提高至30.11%、36.71%、36.90%;突变菌株T194I磷脂酶D的PS产率最高,高达58.32%,相同反应条件下与原始菌株磷脂酶D相比提高了112%;突变体T194I+Q387A和T194I+Q387I的PS产率达到71.24%和73.20%,与WT相比分别提高了159%和167%,与T194IPS产率为58.32%相比分别提高了22.15%和25.51%。
本发明授权一种提高磷脂酶D合成PS活性的理性定向进化方法在权利要求书中公布了:1.一种磷脂酶D的突变蛋白,对磷脂酶D的氨基酸序列进行点突变,所述磷脂酶D的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的序列;所述突变的点位为:单突变T181I、Q387A、Q387I、T194I、双突变T194I、Q387A或双突变T194I、Q387I;所述T181I表示以SEQIDNO.1所示的序列为出发序列,将其第181位氨基酸由苏氨酸突变为异亮氨酸;所述Q387A表示以SEQIDNO.1所示的序列为出发序列,将其第387位氨基酸由谷氨酰胺突变为丙氨酸;所述Q387I表示以SEQIDNO.1所示的序列为出发序列,将其第387位氨基酸由谷氨酰胺突变为异亮氨酸;所述T194I表示以SEQIDNO.1所示的序列为出发序列,将其第194位氨基酸由苏氨酸突变为异亮氨酸。
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