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龙图腾网恭喜中科德佑(山西)生物科技有限公司申请的专利一种外泌体的制备方法及由其制备得到的外泌体和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN113913371B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-09发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202111266068.0，技术领域涉及：C12N5/077；该发明授权一种外泌体的制备方法及由其制备得到的外泌体和应用是由李海源;卢俊锋;陈晓冬设计研发完成，并于2021-10-28向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种外泌体的制备方法及由其制备得到的外泌体和应用在说明书摘要公布了：本发明提供一种外泌体的制备方法及由其制备得到的外泌体和应用。所述制备方法包括以下步骤：1采用胰蛋白酶消化液对自体脂肪组织消化后，清洗，得到脂肪细胞；2将步骤1得到的脂肪细胞置于培养基中培养，得到细胞悬液；3将步骤2得到的细胞悬液与氨甲环酸混合后培养，收集，得到氨甲环酸修饰的自体间充质脂肪干细胞产生的外泌体。该外泌体制剂的有效成分包括自体间充质脂肪干细胞产生的外泌体及氨甲环酸的修饰，且烧伤创面修复的外泌体制剂，需要能够促进创面愈合、并降低创面的黑色素沉着，减少创面愈合后的痕迹。

本发明授权一种外泌体的制备方法及由其制备得到的外泌体和应用在权利要求书中公布了：1.一种外泌体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：1采用胰蛋白酶消化液对自体脂肪组织消化后，清洗，得到脂肪细胞；所述胰蛋白酶消化液包括：胰蛋白酶和EDTA溶液；所述胰蛋白酶消化液中胰蛋白酶的质量百分含量为0.05-0.2％；所述消化具体包括以下步骤：将自体脂肪组织与用于第一次消化的胰蛋白酶消化液混合，进行第一次消化，收集部分消化细胞悬浮液；再将剩余未消化的自体脂肪组织与用于第二次消化的胰蛋白酶消化液混合，进行第二次消化，合并收集，得到消化细胞悬浮液；所述自体脂肪组织、用于第一次消化的胰蛋白酶消化液、用于第二次消化的胰蛋白酶消化液的体积比为15-25:15-20:10-20；2将步骤1得到的脂肪细胞置于培养基中培养，得到细胞悬液；3将步骤2得到的细胞悬液与氨甲环酸混合后培养，收集，得到氨甲环酸修饰的自体间充质脂肪干细胞产生的外泌体；步骤3中，所述细胞悬液与氨甲环酸的体积与质量比为20-30mL:4-15mg；所述培养的温度为36.5-38℃，培养的气体为5％的二氧化碳，培养的时间为1-3h；所述收集具体包括以下步骤：收获培养后的外泌体，进行第一次离心，收集上清液；再进行第二次离心，收集上清液；最后进行第三次离心，弃去上清液，收集沉淀物；所述第一次离心、第二次离心、第三次离心的温度各自独立地为0-8℃；所述第一次离心的转速为1000-3000rpm，第一次离心的时间为10-15min；所述第二次离心的转速为1000-3000rpm，第二次离心的时间为30-40min；所述第三次离心的转速为8000-12000rpm，第三次离心的时间为50-60min；所述沉淀物还需采用7-10mL的PBS缓冲液进行初步悬浮，悬浮后进行总RNA浓度测定；根据初步外泌体PBS悬浮液的总RNA浓度，采用PBS缓冲液进一步稀释，将最终外泌体的总RNA浓度稀释至15-30pgmL。

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