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龙图腾网恭喜深圳大学申请的专利一种荧光发射比率超分辨成像方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115656129B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211340584.8，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种荧光发射比率超分辨成像方法是由陈越;郭嘉庆;李灏;王璐玮;俞宪同;陈钰;宋军;屈军乐设计研发完成，并于2022-10-29向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种荧光发射比率超分辨成像方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种荧光发射比率超分辨成像方法，包括脉冲激光器，脉冲激光器发出的激光经过半波片，再经过格兰激光棱镜，经过格兰激光棱镜其中一束激光传向高速光电二极管探测器，另一束激光传向第一分束器，分别照向第一反射镜和螺旋相位板，经过螺旋相位板的激光传向第二反射镜，经过第二反射镜后传向角反射器，经过第一反射镜的激光传向第二分束器，分别传向角反射器和第三反射镜，经过第三反射器的激光依次通过双色镜、振镜、扫描透镜、管镜和四分之一玻片后，通过物镜聚焦后照射至载物台的样品上。本发明降低超分辨技术对荧光染料和样品制备的要求，拓宽染料的选择范围，为低成本的活体超分辨成像研究提供技术支撑。

本发明授权一种荧光发射比率超分辨成像方法在权利要求书中公布了：1.一种荧光发射比率超分辨成像方法，其特征在于：包括脉冲激光器（1），所述脉冲激光器（1）发出的激光经过半波片（2），再经过格兰激光棱镜（3），经过格兰激光棱镜（3）分成两束激光，其中一束激光传向高速光电二极管探测器（11），所述高速光电二极管探测器（11）连接有时间相关单光子计数器（12），所述时间相关单光子计数器（12）连接有计算机（13），另一束激光传向第一分束器（4），经过第一分束器（4）再次分成两束激光，分别照向第一反射镜（5）和螺旋相位板（6）；经过螺旋相位板（6）的激光传向第二反射镜（9），经过第二反射镜（9）后传向角反射器（10）；所述螺旋相位板（6）用于将激光的波前由高斯型转换成环形，所述角反射器（10）通过延长或缩短环型激发光斑的光程在时间上控制高斯型激光和环形激光之间的脉冲间隔；经过第一反射镜（5）的激光传向第二分束器（7），经过第二分束器（7）再次分成两束，分别传向角反射器（10）和第三反射镜（8）；经过第三反射镜（8）的激光依次通过双色镜（15）、振镜（17）、扫描透镜（18）、管镜（19）和四分之一玻片（20）后，通过物镜（21）聚焦后照射至载物台（22）的样品上；所述载物台（22）的样品被激发后产生荧光，荧光被物镜（21）收集后经四分之一玻片（20）、管镜（19）、扫描透镜（18）、振镜（17）和双色镜（15），被双色镜（15）反射后经过滤光片（16）到达光电倍增管（14），所述滤光片（16）用于去除荧光以外的杂散光，提高图像信噪比，时间相关单光子计数器（12）同时接收高速光电二极管探测器（11）和光电倍增管（14）采集的参考信号和荧光信号，并将数据传输至计算机（13）进行存储和处理；首先，以环形激光脉冲所在的时间通道为界限将荧光信号分为两部分，前半部分的荧光光子由高斯型激光激发，形成由高斯光斑点扩展函数组成的高斯图像，剩余部分的荧光光子由环形激光激发，形成由环形光斑点扩展函数组成的环形图像；然后对高斯图像和环形图像对应坐标的灰度值进行判定，根据判定方案得到荧光发射比率纳米显微图像各坐标的灰度值，高斯图像和环形图像中各像素的灰度值分别由IGaussianx,y和IDountx,y表示；先判断IGaussianx,y各个坐标位置像素的灰度值是否为零，若IGaussianx,y=0，则IFERNx,y图像中对应坐标像素的灰度值为0；若IGaussianx,y≠0，则判断IDountx,y对应坐标位置像素的灰度值是否为零，此时若IDountx,y=0，则IFERNx,y图像中对应坐标像素的灰度值与IGaussianx,y相同；若IDountx,y≠0，则IFERNx,y图像中对应坐标像素的灰度值为IGaussianx,yIDountx,y，根据上述判定，最终得到荧光发射比率纳米显微图像。

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