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龙图腾网恭喜顶探科技(北京)有限公司申请的专利一种利用哺乳动物胚胎培养液检测小RNA的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN110317862B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：201810265343.9，技术领域涉及：C12Q1/6869；该发明授权一种利用哺乳动物胚胎培养液检测小RNA的方法是由王峙峤;胡小明设计研发完成，并于2018-03-28向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种利用哺乳动物胚胎培养液检测小RNA的方法在说明书摘要公布了：本发明是一种提取检测RNA的种类及表达量的方法，特别是提取检测细胞的培养液中微量RNA的方法。多种细胞在培养过程中会向培养液中分泌微量的RNA分子，本方法是通过可能含有RNA的样本特别是细胞的培养液中的RNA分子3’端与5’端加接头，继而进行反转录反应，再进行扩增，还可以利用二代测序的方法对扩增完的DNA产物进行分析，从而判断细胞分泌到培养液中的RNA的种类及表达量的方法。本发明的提取扩增方法，可以结合测序等方法对RNA检测，操作简便，可在不破坏原细胞的情况下获悉细胞中的RNA信息。

本发明授权一种利用哺乳动物胚胎培养液检测小RNA的方法在权利要求书中公布了：1.一种非诊断和非治疗性的提取检测微量小分子RNA的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1提供可能含有RNA的样本，其中，所述样本是细胞的培养液，所述细胞的培养液是受精卵在形成8细胞前或囊胚期前培养大于等于24小时的培养液，且所述细胞的培养液中的RNA包括miRNA，所述miRNA包括miR-372、miR-515、miR-603和miR-191，并且，所述细胞的培养液中的RNA还包括siRNA、piwiRNA、piRNA、snoRNA、scaRNA、sdRNA、tsRNA中的一种或多种；2加入裂解液和RNA消化酶抑制剂；3加入DNA消化酶消化样本中的DNA；4加入核糖体RNA抑制引物，其中所述RNA抑制引物是5.8s核糖体RNA抑制引物，其序列为SEQIDNO：1或SEQIDNO：6；5加入3’接头引物和RNA连接酶，使之连接于样本中RNA的3’端，其中所述3’接头引物的序列为SEQIDNO：2或SEQIDNO：7；6加入反转录引物；7加入5’接头引物和RNA连接酶，使之连接于样本中RNA的5’端，其中所述5’接头引物的序列为SEQIDNO：9或SEQIDNO：10；8加入RNA消化酶抑制剂及反转录酶进行反转录；9加入RNA消化酶消化样本中的RNA；10加入正向扩增引物和DNA聚合酶进行PCR扩增反应；11在步骤10反应结束后，加入反向扩增引物、正向扩增引物和DNA聚合酶进行二次PCR扩增反应。

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