恭喜河南科技大学;山东美正生物科技有限公司陈秀金获国家专利权
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龙图腾网恭喜河南科技大学;山东美正生物科技有限公司申请的专利一种基于PAMAM增敏的赭曲霉毒素A适配体试纸条的制备方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115097115B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-13发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210259358.0,技术领域涉及:G01N33/53;该发明授权一种基于PAMAM增敏的赭曲霉毒素A适配体试纸条的制备方法及应用是由陈秀金;张敏;高栋;牛华伟;柳家鹏;张勋;郭金英;关随霞;李兆周;王耀;曹力设计研发完成,并于2022-03-16向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于PAMAM增敏的赭曲霉毒素A适配体试纸条的制备方法及应用在说明书摘要公布了:本发明公开一种基于PAMAM增敏的赭曲霉毒素A适配体试纸条的制备方法及应用,属于纳米生物检测领域。制备方法包括以下步骤:(1)PAMAM‑AuNPs偶联物的制备,(2)PAMAM‑AuNPs‑aptamer探针的制备,(3)结合垫的制备,(4)适配体互补链DNA1和DNA2与链霉亲和素复合物的制备,(5)T线和C线的制备,(6)试纸条的组装。本发明利用PAMAM树状大分子的末端具有多个活性基团,连接多个金纳米粒子,提高适配体试纸条的灵敏度,并通过ImageJ软件读取试纸条上显色带的光密度值,实现试纸条的半定量分析。
本发明授权一种基于PAMAM增敏的赭曲霉毒素A适配体试纸条的制备方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种基于PAMAM增敏的赭曲霉毒素A适配体试纸条的制备方法,其特征在于,所述制备方法如下所示: (1)PAMAM-AuNPs偶联物的制备 量取浓缩后的AuNPs溶液,加入0.1molLK2CO3溶液调pH至8.0-9.0,然后加入浓度为50μM的PAMAM溶液,室温下反应5h,以12000rpm离心20min,再用超纯水重悬,4℃储存备用; (2)PAMAM-AuNPs-aptamer探针的制备 将浓度为100μM的适配体溶液加入到PAMAM-AuNPs偶联物中,加入80mM的NaCl溶液至终浓度为50mM,在室温下避光孵育48h,以10000rpm离心18min后,加pH8.0-9.0的PB缓冲溶液洗涤两次,加入偶联物复溶液重悬,最后在4℃条件下保存; 结合垫的制备 将制备的PAMAM-AuNPs-aptamer探针通过划膜喷金仪喷于聚酯纤维素膜上,37℃烘干并于避光条件下储存备用;所述聚酯纤维素膜预先用结合垫处理液进行处理; 适配体互补链DNA1和DNA2与链霉亲和素复合物的制备 将链霉亲和素溶解于pH7.4、0.01molLPBS缓冲液中,取40μL、1mgmL链霉亲和素分别加入到40μL适配体互补链DNA1和DNA2中,然后加入20μL、0.01molLPBS缓冲溶液,4℃下孵育2h; T线和C线的制备 使用划膜喷金仪将互补链DNA1和DNA2与链霉亲和素复合物分别喷在硝酸纤维素膜上作为T线和C线; 试纸条的组装 将样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸依次固定在聚乙烯底板上,然后切成3.5mm宽,密封干燥保存;其中所述样品垫预先用样品垫处理液进行处理。
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