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龙图腾网恭喜西北工业大学申请的专利一种基于CRISPR/Cas12a与杂交链式放大反应的PSA检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114990195B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202110943524.4，技术领域涉及：C12Q1/682；该发明授权一种基于CRISPR/Cas12a与杂交链式放大反应的PSA检测方法是由王京;王万河;刘瀞琦;刘建华设计研发完成，并于2021-08-17向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于CRISPR/Cas12a与杂交链式放大反应的PSA检测方法在说明书摘要公布了：本发明涉及一种基于CRISPRCas12a与杂交链式放大反应的PSA检测方法，首先通过基于核酸适配体的杂交链扩增反应，将PSA的信号转换为DNA信号，杂交链反应产物的重复DNA结构可识别并激活CRISPRCas12a系统的反向酶切功能，并将连接两种金纳米颗粒的单链DNA切成含2‑4个碱基的片段，使金纳米颗粒由聚集变为分散状态，溶液的颜色表现为紫色向红色的变化。本发明通过紫外可见吸收光谱，肉眼可见的颜色变化和动态光散射DLS研究了该方法的可行性。

本发明授权一种基于CRISPR/Cas12a与杂交链式放大反应的PSA检测方法在权利要求书中公布了：1.一种基于CRISPRCas12a与杂交链式放大反应的非诊断目的前列腺特异性抗原PSA检测方法，其特征在于：所需要的DNA序列表为： 注：n是2-10中的随机数字，x是6-20中的随机数字，y是1-50中的随机数字； PSA检测步骤如下： 步骤1、制备脱氧核糖核酸DNA修饰的AuNPs：将巯基修饰的DNA即Oligo7和Oligo8；分别溶解于pH为5.0的醋酸盐缓冲溶液，再加入三（2-羧乙基）膦（TCEP），以还原修饰在DNA上的巯基为二硫键，然后将上述溶液全部转移至1-20.0mLAuNPs溶液中，室温孵育1.0~26.0小时； 然后在接下来的10.0~64.0小时内，向金纳米粒子溶液中加入氯化钠溶液，并使最终溶液中NaCl的浓度为10.0~400.0mM； 修饰完成，将溶液离心处理多次，每次离心不少于15.0分钟，以除去未修饰到金纳米粒子表面的DNA，得到脱氧核糖核酸DNA修饰的AuNPs； 步骤2、基于核酸适配体的杂交链式反应：将发卡结构的DNA即Oligo3、Oligo4、Oligo5；在80.0~105.0℃的条件下加热不少于5.0分钟，然后自然冷却至室温；将待检测溶液与适配体即Oligo2在20~40℃孵育不少于5分钟备用，接下来的延伸反应在20~40℃条件下进行；PSA与适配体即Oligo2在含有Tris-Cl的缓冲溶液中20~40℃反应不少于5.0分钟，然后按1:10:10:10的比例加入Oligo1、Oligo3、Oligo4和Oligo5,在20~40℃条件下进行不少于30分钟的杂交链式反应，反应后的产物以离心不少于1分钟，取上清液； 步骤3、CRISPRCas12a反向酶切功能的激活：Cas12acrRNA反应液中含有NaCl、Tris-HCl、MgCl2和牛胎血清蛋白成分；反应液中按1:1.2的比例加入Cas12a和crRNA，再加入Oligo5，20~40℃孵育不少于10分钟，再加入步骤2得到的上清液，20~40℃反应不少于20分钟得反应液； 步骤4、显色反应及吸收光谱的测量：向步骤3的反应液中加入步骤1中制备的脱氧核糖核酸DNA修饰的AuNPs，等待不少于5分钟，若被测溶液中存在PSA，溶液变色的向红色方向进行，证明被测溶液中存在PSA。

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