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龙图腾网获悉青岛科技大学申请的专利一种全基因组5-羟甲基胞嘧啶的检测方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119614709B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510157731.5，技术领域涉及：C12Q1/6886；该发明授权一种全基因组5-羟甲基胞嘧啶的检测方法及应用是由李琛琛;邢天蕴;荆赛;曹硕;罗细亮设计研发完成，并于2025-02-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种全基因组5-羟甲基胞嘧啶的检测方法及应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种全基因组5‑羟甲基胞嘧啶的检测方法及应用，涉及生化检测技术领域。包括以下步骤：1：封闭待测DNA的3’‑OH端；2：糖基化5hmCDNA的制备；3：TdT介导的DNA扩增；4：荧光测量。本发明构建了用于全基因组中的5‑羟甲基胞嘧啶检测的均相、非模板依赖型的信号放大方法。此方法基于特异性酶催化反应和多重信号放大策略，有灵敏度高，特异性好，无需分离步骤，扩增无序列依赖性，能够检测全基因组中任何位置5hmC的特点。并且，本发明能够实现实际临床样本的准确和灵敏检测。

本发明授权一种全基因组5-羟甲基胞嘧啶的检测方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种非诊断目的的全基因组5-羟甲基胞嘧啶的检测方法，其特征在于，包括以下步骤： 1封闭待测DNA的3’-OH端： 在待测DNA中加入末端转移酶TdT、三磷酸腺嘌呤双脱氧核苷酸ddATP，在TdT的作用下，将ddATP修饰到待测DNA双链的3’-OH端； 加入虾碱性磷酸酶rSAP水解多余的ddATP，得到封闭后的待测DNA； 2糖基化5hmCDNA的制备： 在所述封闭后的待测DNA中加入T4β-葡糖基转移酶T4β-GT、尿苷二磷酸葡萄糖UDP-Glc，在T4β-GT的催化下，UDP-Glc中的葡萄糖基转移到待测DNA中5hmC的羟甲基上进行糖基化反应，5hmC被葡萄糖基共价修饰形成5ghmC，得到糖基化5hmCDNA； 3TdT介导的DNA扩增： 在所述糖基化5hmCDNA中加入DNA修饰依赖型核酸内切酶AbaSI，AbaSI识别并选择性切割含有5ghmC的糖基化5hmCDNA双链，在距离5ghmC分别11-13nt和9-10nt处产生双链DNA断裂，形成具有2-3个碱基的3’-OH突出粘性末端； 加入TdT、脱氧三磷酸腺苷dATP，在TdT的催化下，dATP在糖基化5hmCDNA的3’-OH突出粘性末端聚合延伸，生成poly-A链，得到待荧光检测的DNA； 4荧光测量： 在所述待荧光检测的DNA中加入含有AP位点的信号探针、脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶APE1，信号探针与待荧光检测的DNA中的poly-A链互补配对形成双链，信号探针中的AP位点被APE1水解，荧光基团被释放，荧光恢复。

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