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申请/专利权人：武汉优恩生物科技有限公司

摘要：本发明公开了一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，具体检测方法步骤如下：步骤一：使用上转换纳米粒子分别标记包被用SFTS重组NP蛋白，再加入0.02‑0.06mgml的植物凝集素稀释液，制备检测分析液；步骤二：将待检测血清与检测分析液以1:1混合均匀，将100μl混合液加入检测卡的点样孔；步骤三：利用荧光扫描检测仪对步骤二中的混合液体进行检测，计算出误差的大小；步骤四：在步骤三正常的基础上利用荧光免疫层析法检测100例健康人血清；步骤五：将步骤四的检测结果传输到单片机控制器中读取TC值，并计算均值A、标准偏差SD和Cutoff值。该发明一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，检测速度快，数据处理精准，实用性强，便于生产，适合广泛推广使用。

主权项：1.一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，其特征在于，具体检测方法步骤如下：步骤一：使用上转换纳米粒子分别标记包被用SFTS重组NP蛋白，再加入0.02‑0.06mgml的植物凝集素稀释液，制备检测分析液；步骤二：将待检测血清与检测分析液以1:1混合均匀，将100μl混合液加入检测卡的点样孔；步骤三：利用荧光扫描检测仪对步骤二中的混合液体进行检测，计算出误差的大小；步骤四：在步骤三正常的基础上利用荧光免疫层析法检测100例健康人血清；步骤五：将步骤四的检测结果传输到单片机控制器中读取TC值，并计算均值A、标准偏差SD和Cutoff值；步骤六：将步骤四中检测数据利用单片机控制器进行独立元分析法ICA进行数据预处理、分析和运算；步骤七：所述处理器内包括历史曲线模块和查询模块和对比分析模块，将步骤五和步骤六的计算处理数据传输到对比分析模块进行对比分析；步骤八：将检测分析结果通过无线传输模块传送带显示器上。

全文数据：一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法技术领域本发明属于免疫检测技术领域，具体涉及一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法。背景技术市场上的胶体金免疫层析试剂，虽然简单、成本低，适用于现场快速检测，但方法中的金颗粒示踪物的特性决定了其检测系统的缺陷，检测灵敏度低，假阴性率偏高。SFTSV是自然疫源性疾病，通常发生于山区和丘陵等医疗卫生条件相对较差的地区，医疗卫生水平较低，加之病例就医观念较差，极大地影响了疾病的早期诊断与治疗。发明内容本发明的目的在于提供一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，以解决上述背景技术中提出的但方法中的金颗粒示踪物的特性决定了其检测系统的缺陷，检测灵敏度低，假阴性率偏高。SFTSV是自然疫源性疾病，通常发生于山区和丘陵等医疗卫生条件相对较差的地区，医疗卫生水平较低，加之病例就医观念较差，极大地影响了疾病的早期诊断与治疗的问题。为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，具体检测方法步骤如下：步骤一：使用上转换纳米粒子分别标记包被用SFTS重组NP蛋白，再加入0.02-0.06mgml的植物凝集素稀释液，制备检测分析液；步骤二：将待检测血清与检测分析液以1:1混合均匀，将100μl混合液加入检测卡的点样孔；步骤三：利用荧光扫描检测仪对步骤二中的混合液体进行检测，计算出误差的大小；步骤四：在步骤三正常的基础上利用荧光免疫层析法检测100例健康人血清；步骤五：将步骤四的检测结果传输到单片机控制器中读取TC值，并计算均值A、标准偏差SD和Cutoff值；步骤六：将步骤四中检测数据利用单片机控制器进行独立元分析法ICA进行数据预处理、分析和运算；步骤七：所述处理器内包括历史曲线模块和查询模块和对比分析模块，将步骤五和步骤六的计算处理数据传输到对比分析模块进行对比分析；步骤八：将检测分析结果通过无线传输模块传送带显示器上。进一步地，所述步骤四中以固定有检测线和质控线的条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，荧光标记抗体或抗原固定于连接垫，通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。进一步地，所述步骤五中，Cutoff值＝TC均值+2SD。进一步地，所述荧光免疫分析的标记物主要包括荧光素、量子点等。进一步地，所述步骤七中历史曲线模块可以将以往的检测结果以曲线的方式呈现，查询模块与PC终端和手机客户端通过网络相连。进一步地，所述步骤一中加入植物凝集素稀释液10-15min后加入敏化剂。与现有技术相比，本发明的有益效果是：1、通过上转换纳米粒子分别标记包被用SFTS重组NP蛋白，由于具有核壳结构的上转换纳米粒子UCNPs可以显著增强光致发光效率，所以其在光学成像引导生物成像、治疗学方面有很好的应用前景，标记SFTS重组NP蛋白准确，不易在后期的研究中出现误差。2、进行独立元分析时，需要进行数据预处理。该数据处理分析方法计算速度快，准确性高，克服了外界环境带来的影响。3、单片机控制器中读取TC值，并计算均值A、标准偏差SD和Cutoff值，检测出的免疫数据更具有代表性，并且与进行独立元分析后的数据通过处理器对比分析后，得出结论，有效的提高了精准度。4该发明一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，针对SFTSV自然疫源性疾病检测速度快，检测灵敏度高，假阴性率低，数据处理精准，实用性强，便于生产，适合广泛推广使用。具体实施方式下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例1一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，具体检测方法步骤如下：步骤一：使用上转换纳米粒子分别标记包被用SFTS重组NP蛋白，再加入0.02-0.06mgml的植物凝集素稀释液，制备检测分析液；步骤二：将待检测血清与检测分析液以1:1混合均匀，将100μl混合液加入检测卡的点样孔；步骤三：利用荧光扫描检测仪对步骤二中的混合液体进行检测，计算出误差的大小；步骤四：在步骤三正常的基础上利用荧光免疫层析法检测100例健康人血清；步骤五：将步骤四的检测结果传输到单片机控制器中读取TC值，并计算均值A、标准偏差SD和Cutoff值；步骤六：将步骤四中检测数据利用单片机控制器进行独立元分析法ICA进行数据预处理、分析和运算；步骤七：所述处理器内包括历史曲线模块和查询模块和对比分析模块，将步骤五和步骤六的计算处理数据传输到对比分析模块进行对比分析；步骤八：将检测分析结果通过无线传输模块传送带显示器上。其中，所述步骤四中以固定有检测线和质控线的条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，荧光标记抗体或抗原固定于连接垫，通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。其中，所述步骤五中，Cutoff值＝TC均值+2SD。其中，所述荧光免疫分析的标记物主要包括荧光素、量子点等。其中，所述步骤七中历史曲线模块可以将以往的检测结果以曲线的方式呈现，查询模块与PC终端和手机客户端通过网络相连。其中，所述步骤一中加入植物凝集素稀释液10-15min后加入敏化剂。实施例2一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，具体检测方法步骤如下：步骤一：使用荧光素分别标记包被用SFTS重组NP蛋白，再加入0.02-0.06mgml的植物凝集素稀释液，制备检测分析液；步骤二：将待检测血清与检测分析液以1:1混合均匀，将100μl混合液加入检测卡的点样孔；步骤三：利用荧光扫描检测仪对步骤二中的混合液体进行检测，计算出误差的大小；步骤四：在步骤三正常的基础上利用荧光免疫层析法检测100例健康人血清；步骤五：将步骤四的检测结果传输到单片机控制器中读取TC值，并计算均值A、标准偏差SD和Cutoff值；步骤六：将步骤四中检测数据利用单片机控制器进行独立元分析法ICA进行数据预处理、分析和运算；步骤七：所述处理器内包括历史曲线模块和查询模块和对比分析模块，将步骤五和步骤六的计算处理数据传输到对比分析模块进行对比分析；步骤八：将检测分析结果通过无线传输模块传送带显示器上。其中，所述步骤四中以固定有检测线和质控线的条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，荧光标记抗体或抗原固定于连接垫，通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。其中，所述步骤五中，Cutoff值＝TC均值+2SD。其中，所述荧光免疫分析的标记物主要包括上转换纳米粒子、量子点等。其中，所述步骤七中历史曲线模块可以将以往的检测结果以曲线的方式呈现，查询模块与PC终端和手机客户端通过网络相连。其中，所述步骤一中加入植物凝集素稀释液10-15min后加入敏化剂。本发明工作时：通过上转换纳米粒子分别标记包被用SFTS重组NP蛋白，由于具有核壳结构的上转换纳米粒子UCNPs可以显著增强光致发光效率，所以其在光学成像引导生物成像、治疗学方面有很好的应用前景，标记SFTS重组NP蛋白准确，不易在后期的研究中出现误差；进行独立元分析时，需要进行数据预处理。该数据处理分析方法计算速度快，准确性高，克服了外界环境带来的影响；单片机控制器中读取TC值，并计算均值A、标准偏差SD和Cutoff值，检测出的免疫数据更具有代表性，并且与进行独立元分析后的数据通过处理器对比分析后，得出结论，有效的提高了精准度。该发明一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，针对SFTSV自然疫源性疾病检测速度快，检测灵敏度高，假阴性率低，数据处理精准，实用性强。尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

权利要求：1.一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，其特征在于，具体检测方法步骤如下：步骤一：使用上转换纳米粒子分别标记包被用SFTS重组NP蛋白，再加入0.02-0.06mgml的植物凝集素稀释液，制备检测分析液；步骤二：将待检测血清与检测分析液以1:1混合均匀，将100μl混合液加入检测卡的点样孔；步骤三：利用荧光扫描检测仪对步骤二中的混合液体进行检测，计算出误差的大小；步骤四：在步骤三正常的基础上利用荧光免疫层析法检测100例健康人血清；步骤五：将步骤四的检测结果传输到单片机控制器中读取TC值，并计算均值A、标准偏差SD和Cutoff值；步骤六：将步骤四中检测数据利用单片机控制器进行独立元分析法ICA进行数据预处理、分析和运算；步骤七：所述处理器内包括历史曲线模块和查询模块和对比分析模块，将步骤五和步骤六的计算处理数据传输到对比分析模块进行对比分析；步骤八：将检测分析结果通过无线传输模块传送带显示器上。2.根据权利要求1所述的一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，其特征在于：所述步骤四中以固定有检测线和质控线的条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，荧光标记抗体或抗原固定于连接垫，通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。3.根据权利要求1所述的一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，其特征在于：所述步骤五中，Cutoff值＝TC均值+2SD。4.根据权利要求1所述的一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，其特征在于：所述荧光免疫分析的标记物主要包括荧光素、量子点等。5.根据权利要求1所述的一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，其特征在于：所述步骤七中历史曲线模块可以将以往的检测结果以曲线的方式呈现，查询模块与PC终端和手机客户端通过网络相连。6.根据权利要求1所述的一种基于SFTS重组NP蛋白纳米粒子免疫检测方法，其特征在于：所述步骤一中加入植物凝集素稀释液10-15min后加入敏化剂。

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