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一种鉴定德国小蠊所食蚤蝇种类的方法 

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申请/专利权人:中南大学

摘要:本发明公开了一种鉴定德国小蠊所食蚤蝇种类的方法,该方法包括以下步骤:采集现场德国小蠊的完整肠道并提取全部DNA,所得全部DNA为待鉴定样品;采集现场不同蚤蝇的DNA并设计特异性引物;将所述蛆症异蚤蝇的特异性引物、东亚异蚤蝇的特异性引物和通用引物分别对待鉴定样品进行PCR扩增;对扩增后的产物用一定质量浓度的琼脂糖凝胶进行电泳;若有对应的蚤蝇DNA片段条带,则待鉴定样品中有对应的蚤蝇。本发明应用于环境相对密闭的死亡现场,判断现场提取到的德国小蠊是否取食的尸体上的蛆症异蚤蝇和东亚异蚤蝇,本发明通过设计这两种蚤蝇的特异性引物,只需经过电泳,判断对应条带的有无即可进行判断,具有操作简便、节约时间的优势。

主权项:1.一种鉴定德国小蠊所取食蚤蝇种类的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:采集现场德国小蠊的完整肠道并提取全部DNA,所得全部DNA为待鉴定样品;步骤2:采集现场不同蚤蝇的DNA并设计特异性引物;其中,所述特异性引物包括蛆症异蚤蝇的特异性引物和东亚异蚤蝇的特异性引物;所述蛆症异蚤蝇的特异性引物序列为:F:5'-ACCCCGGTGCTTTAATTGGT-3';R:5'-ATTGGATCTCCCCCTCCTGC-3';所述东亚异蚤蝇的特异性引物序列为:F:5'-TTTTGGTGCTTGAGCTGGGA-3';R:5'-GCTCCAGCTAATACAGGAAGAGA-3';步骤3:将所述蛆症异蚤蝇的特异性引物、东亚异蚤蝇的特异性引物和通用引物分别对待鉴定样品进行PCR扩增;其中,所述通用引物的引物序列为:F:5'-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3';R:5'-RAAACTTCAGGRTGACCAAAGAATCA-3';步骤4:对扩增后的产物用一定质量浓度的琼脂糖凝胶进行电泳;若有对应的蚤蝇DNA片段条带,则待鉴定样品中有对应的蚤蝇。

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