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申请/专利权人：云南省烟草农业科学研究院;昆明理工大学
摘要：一种利用高地芽孢杆菌J54菌株降低烟叶TSNAs的方法，包括以下步骤：A、烟叶粉碎：将烤干后的硃砂烟烟叶研磨成粉末，过筛；B、菌液制备：将甘油管保存的高地芽孢杆菌J54菌种于LB固体培养基上划线，然后置于28‑30℃恒温培养箱中培养，挑选一颗单菌落转接至LB液体培养基中，置于恒温振荡培养箱中培养20‑50h得到发酵菌剂，然后用无菌去离子水将菌剂的OD值调至OD600＝1.8‑2.0，得到菌液；C、发酵：将烟叶粉末加入到无机盐基础培养基中作为菌株的营养源，经高压蒸汽灭菌后再加入菌液，所述菌液的使用量为发酵体系总体积的0.8‑1.2％，置于28‑30℃恒温振荡培养箱中以150‑160rpmmin的转速培养6‑8天或置于35‑37℃恒温振荡培养箱中以150‑160rpmmin的转速培养7‑21天。本发明开拓性的通过接种菌种降低烟叶TSNAs。
主权项：1.一种利用高地芽孢杆菌J54菌株降低烟叶TSNAs的方法，其特征在于包括以下步骤：A、烟叶粉碎：将烤干后的硃砂烟烟叶研磨成粉末，然后过筛，得到发酵原材料；B、菌液制备：将甘油管保存的高地芽孢杆菌J54菌种于LB固体培养基上划线，所述高地芽孢杆菌J54菌株的保藏编号为CCTCCNo.M2019667，然后置于28-30℃恒温培养箱中过夜培养至长出单菌落，挑选一颗单菌落转接至LB液体培养基中，置于28-30℃、150-160rpmmin恒温振荡培养箱中培养20-50h得到发酵菌剂，然后用无菌去离子水将菌剂的OD值调至OD600＝1.8-2.0，得到菌液；C、发酵：将烟叶粉末加入到无机盐基础培养基中作为菌株的营养源，经高压蒸汽灭菌后再加入菌液，所述菌液的使用量为发酵体系总体积的0.8-1.2％，置于28-30℃恒温振荡培养箱中以150-160rpmmin的转速培养6-8天或置于35-37℃恒温振荡培养箱中以150-160rpmmin的转速培养7-21天。
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百度查询： 云南省烟草农业科学研究院 昆明理工大学 一种利用高地芽孢杆菌J54降解烟叶中TSNAs的液态发酵方法
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