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前脑神经干细胞体外诱导及长期培养体系、诱导培养方法及应用 

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申请/专利权人:中国人民解放军海军军医大学

摘要:本发明提供了前脑神经干细胞体外诱导及长期培养体系、诱导培养方法及应用,包含基础培养基以及与其分别组合使用的诱导分化因子和体外培养因子。其中,基础培养基包括DMEMF12液体基础培养基、0‑5×B27添加剂、0‑5×N2添加剂、1%青霉素链霉素、0.01‑500μgmL2‑磷酸‑维生素C;诱导分化因子包括0.01‑500μMTGFβ抑制剂、0.01‑10000μMBMP抑制剂、0.01‑50μMPorcupine抑制剂;体外培养因子包括0.01‑10000nMSrc激酶抑制剂、0.01‑500μMTGFβ抑制剂、0.01‑50μMGSK3抑制剂、0.01‑500ngmLEGF家族生长因子、0.01‑500ngmLFGF家族生长因子。使用该培养体系,可以在体体外诱导多能干细胞分化为前脑神经干细胞及体外长期培养,并维持稳定的前脑神经干细胞的分子表型和分化潜能。

主权项:1.一种前脑神经干细胞体外诱导及长期培养体系,其特征在于,用于体外诱导人多能干细胞分化为前脑神经干细胞并能够于体外长期培养,由基础培养基以及与该基础培养基分别组合使用的诱导分化因子和体外培养因子组成,所述基础培养基由DMEMF12液体基础培养基、0.5-5×B27添加剂、0.5-5×N2添加剂、1%青霉素链霉素、0.01-500μgmL2-磷酸-维生素C组成;所述诱导分化因子由0.01-500μMTGFβ抑制剂、0.01-10000μMBMP抑制剂、0.01-50μMPorcupine抑制剂组成;所述体外培养因子由0.01-10000nMSrc激酶抑制剂、0.01-500μMTGFβ抑制剂、0.01-50μMGSK3抑制剂、0.01-500ngmLEGF家族生长因子、0.01-500ngmLFGF家族生长因子组成,所述GSK3抑制剂为CHIR99021、BIO及LY2090314中的一种或多种;TGFβ抑制剂为SB431542、LY2109761及A-83-01中的一种或多种;BMP抑制剂为DMH1、K02288、LDN-193189、Noggin中的一种或多种;Porcupine抑制剂为LGK974,GNF-6231,Wnt-C59中的一种或多种;EGF家族生长因子为EGF、TGFα及HB-EGF中的一种或多种;FGF家族生长因子为FGF1~FGF23中的任意一种或多种;Src激酶抑制剂为Dasatinib、Saracatinib及KX2-391中的一种或多种。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国人民解放军海军军医大学 前脑神经干细胞体外诱导及长期培养体系、诱导培养方法及应用

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