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申请/专利权人：山东中医药大学

摘要：本发明公开了香附中活性成分制备方法及其在抗炎药物中的应用，香附晾晒后粉碎，使用石油醚在室温下提取，每次24h，提取2次，每隔3h搅拌1次，过滤提取液，减压浓缩，冷冻干燥得到香附粗提物，将香附粗提物和溶剂加入到容器中，进行超声溶解，得样品溶液；采用HSCCC的首尾洗脱模式将样品溶液分离，获得萜类化合物。本申请可以有效分离香附中的萜类化合物。

主权项：1.香附中活性成分制备方法，其特征在于，按照以下步骤进行:香附粗提取物的制备：将香附晾晒后粉碎，使用石油醚在室温下提取2次，每次24h，每隔3h搅拌1次，经过滤、减压浓缩、冷冻干燥即得香附粗提物；溶剂制备：将正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水按照体积比1:0.1～0.4:1:0.1～0.4混匀，静置分层，得溶剂，其中上层为上相，下层为下相；制备样品溶液：向香附粗体物中加入上相和下相，超声溶解，即得样品溶液；高速逆流色谱：采用HSCCC的首尾洗脱模式对样品溶液进行分离，上相作固定相，下相作流动相，超声脱气，打开冷肼，温度设定为25℃，以30mlmin的流速将固定相泵入到色谱柱中，完全充满后，正转调节转速850rpm，流动相以2mLmin的流速开始平衡，至达到流体力学平衡；样品溶液通过进样阀手动注入到色谱柱中，设置紫外检测器吸光度254nm处连续监测，并打开记录仪记录色谱数据图；在连续注射方式下，以5.0mLmin的流速将下相泵入，所有峰洗脱一次分离后，再注入样品溶液进行下次分离；通过254nm紫外检测器，不断观察柱出口流出液，根据记录的洗脱剖面收集峰组分，将气体注入柱内吹出溶剂，将流出液在旋转蒸发器中浓缩直至干燥，以获得用于二维分离的样品；内循环模式分离：采用六通阀连接离线二维分离模式，首先设置六通阀，在850rpm的转速下，将固定相以30mLmin的速度泵入设备，流动相以2.0mLmin的速度泵入，平衡后将用于二维分离的样品溶液注入，洗脱目标峰后，将六通阀设置为内循环模式，进行多次循环分离，通过自动收集器连续收集洗脱液，根据色谱图将每个峰馏分分别收集到试剂瓶中，减压浓缩收集的馏分，即得萜类化合物；所述香附和石油醚的质量体积比为1:20kgL；香附粗体物、上相和下相的质量体积比为200mg:10ml:10ml；所述用于二维分离的样品溶液是将上相和下相加入到用于二维分离的样品中，进行超声溶解后获得；用于二维分离的样品、上相和下相的质量体积比200mg:10ml:10ml；所述香附中倍半萜类化合物化学式分别为

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