申请/专利权人:中国科学院合肥物质科学研究院;合肥中科易康达生物医学有限公司
申请日:2021-11-29
公开(公告)日:2023-11-07
公开(公告)号:CN113897463B
主分类号:C12Q1/70
分类号:C12Q1/70;C12Q1/6893;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.11.07#授权;2022.01.25#实质审查的生效;2022.01.07#公开
摘要:本发明公开同时检测对虾WSSV、IHHNV、EHP、SHIV多重荧光PCR检测试剂盒,包括冻干固态PCRMix,液态复溶Buffer、冻干固态阴性对照和冻干固态阳性对照,所述冻干固态PCRMix含有WSSVVP644基因、IHHNVNS2基因、EHP18s基因和SHIVMCP基因对应的特异性引物探针序列组;所述引物和探针的序列如SEQIDNO:1‑12所示。本发明还提供使用上述试剂盒检测对虾WSSV、IHHNV、EHP、SHIV的方法。本发明提供的试剂盒采用全预混冻干多重荧光PCR法,能够同时检测对虾WSSV、IHHNV、EHP、SHIV这四种病原体,大大节约的检测时间,具有灵敏度高、操作技术要求低和防污染等优点。
主权项:1.同时检测对虾WSSV、IHHNV、EHP、SHIV多重荧光PCR检测试剂盒,其特征在于:包括冻干固态PCRMix,液态复溶Buffer、冻干固态阴性对照和冻干固态阳性对照,所述冻干固态PCRMix含有WSSV上游引物序列为5’-CAATGGTCCCGTCCTCATCT-3’,下游引物序列为5’-AGCTGCCTTGCCGGAAA-3’,探针序列为5’-AGCCATGAAGAATGCCGTCTATCACACACT-3’;IHHNV上游引物序列为5’-CCATTACAGATCATGGTGACCACT-3’,下游引物序列为5’-GTAACTCCCAAATAGGCGAGG-3’,探针序列为5’-CGGACACCCAACCAATAAGACCAGA-3’;EHP上游引物序列为5’-GGGCAAAGAATGAAATCTCAAGA-3’,下游引物序列为5’-CCCAGATACGTCTAAGAGCATCG-3’,探针序列为5’-CACCTGGACCAACGGAGGCGAA-3’;SHIV上游引物序列为5’-TGGACCAAACATTTGGATTGG-3’,下游引物序列为5’-TTACGACATCAGGTTCCAGAGAAC-3’,探针序列为5’-TTCCTGACACCGAAGAAGAGAGCCTT-3’;所述WSSV、IHHNV、EHP、SHIV的探针序列的5’端分别标记荧光报告基团FAM、VIC、ROX、Cy5,3’端标记荧光淬灭基团BHQ1MGB。
全文数据:
权利要求:
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