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申请/专利权人:广西科学院;广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所
摘要:本发明涉及一种丽花石山苣苔的组织培养方法,涉及农业生物技术中植物组织培养领域,包括如下步骤:1诱导不定芽培养,2继代增殖培养,3生根培养,4炼苗移栽。通过诱导不定芽培养、继代增殖培养、生根培养、炼苗移栽过程成功获得了离体再生植株,建立起了组织培养快速繁殖技术体系,对于进行丽花石山苣苔优良种质资源的保护、快速繁殖和大面积推广、促进丽花石山苣苔的解濒和产业化发展具有重要意义。
主权项:1.一种丽花石山苣苔的组织培养方法,其特征在于,包括如下步骤:1)诱导不定芽培养,2)继代增殖培养,3)生根培养,4)炼苗移栽;所述步骤1)诱导不定芽培养具体为:选取继代无菌苗的叶柄为外植体,用解剖刀在叶柄上轻轻划2-4刀增加伤口,接种到诱导不定芽培养基上,于25~28°C条件下全暗培养4天,再转移至光照强度为1500~2000lx,培养温度为25~28°C的条件下,每天光照12小时,直至诱导形成不定芽为止;所述继代增殖培养具体为:将步骤1)诱导形成的不定芽从基部切下,接种到继代增殖培养基上进行继代培养,接种后置于光照强度为2500lx,培养温度为25~28℃的条件,每天光照12~15小时,继代培养长至2~4cm的不定芽;所述生根培养具体为:将步骤2)继代培养长至2~4cm的不定芽分切并接种到生根培养基上进行诱导生根,接种后先在25~28℃条件下500lx光培养3天,然后置于光照强度为2500lx,培养温度为25~28℃的条件下,每天光照12~15小时,培养至生根,得到长至5~8cm的生根试管苗;所述步骤1)的诱导不定芽培养基为:MS基础培养基、1~2mgLTDZ、0.1~0.5mgLKT、0.05~0.2mgLNAA、15~30gL蔗糖、3.5~6.0gL琼脂,pH为5.4~5.8;所述步骤2)继代增殖培养基为:MS基础培养基、0.1~1mgL6-BA、0.05~0.1mgLNAA、15~30gL蔗糖、3.5~6gL琼脂,pH为5.4~5.8;所述步骤3)生根培养基为:12MS基础培养基、0.05~0.2mgLIBA、1.0~2.0mgLGGR、15~30gL蔗糖、3.5~6gL琼脂,pH为5.4~5.8。
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