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申请/专利权人：湖南诺合新生物科技有限公司
摘要：本发明公开了一种FUS在作为融合标签中的应用，重组蛋白及其表达和纯化方法，重组蛋白包括：编码FUS的核苷酸序列的第一核酸元件；编码能够被酶或化学方法切割的核苷酸序列的第二核酸元件；编码多肽或蛋白质的靶序列的第三核酸元件。其表达方法包括：扩增核酸片段、制备重组质粒、转化至农杆菌、扩大培养、注射至植物叶片。纯化方法包括透析、聚集、重溶、切割等。本发明首次利用FUS作为融合标签，在植物中表达重组蛋白，FUS融合蛋白可以在叶片中形成蛋白颗粒，使形成的蛋白聚集在一起，从而减小蛋白对植物细胞的毒性，延长植物生产该蛋白的周期，增大产量。纯化可通过控制pH使其分离，方法简单，纯度高，成本低。
主权项：1.一种重组蛋白的表达方法，其特征在于，所述重组蛋白由第一核酸元件、第二核酸元件和第三核酸元件编码；所述第一核酸元件编码FUS蛋白；所述第二核酸元件编码SspDnaB；所述第三核酸元件编码SAM；所述FUS蛋白为FPGE；所述FPGE如SEQIDNo.3所示；所述第一核酸元件、第二核酸元件、第三核酸元件处于同一个阅读框；所述第一核酸元件的3’端与所述第二核酸元件的5’端相连，且所述第二核酸元件的3’端与所述第三核酸元件的5’端相连；所述表达方法包括以下步骤：S1、扩增所述第一核酸元件、所述第二核酸元件和所述第三核酸元件的核酸片段；S2、将扩增获得的核酸片段连接在一起，转化至载体中获得重组质粒；S3、将所述重组质粒转化至农杆菌中，筛选阳性克隆；S4、将所述阳性克隆扩大培养获得菌液；S5、将所述菌液通过注射或真空浸渗法转入植物叶片中培养，获得所述蛋白。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 湖南诺合新生物科技有限公司 FUS蛋白在作为融合标签中的应用，重组蛋白及其表达方法
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