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用于培养MDCK细胞的添加剂和化学限定培养基及其用途 

申请/专利权人:天信和(苏州)生物科技有限公司

申请日:2022-11-29

公开(公告)日:2024-02-09

公开(公告)号:CN115595295B

主分类号:C12N5/071

分类号:C12N5/071;C12N7/00;C12N7/02;A61K39/145;A61K39/15;A61P31/14;A61P31/16

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.02.09#授权;2023.02.07#实质审查的生效;2023.01.13#公开

摘要:本发明提出了一种用于对MDCK细胞进行培养的添加剂,其不含血清等蛋白成分,采用该添加剂与MEM培养基配合使用,支持MDCK细胞悬浮生长,可有效地实现细胞扩增或培养;并且,在进行MDCK细胞或病毒扩增、尤其是病毒疫苗的扩增生产时,获得的产品不含血清等蛋白成分,可降低引发动物机体的免疫反应的风险,具有安全性高等优点,且便于后续产品的分离纯化,更适合工业化生产。

主权项:1.一种用于培养MDCK细胞的无血清培养基,其特征在于,该培养基为化学限定培养基,且该化学限定培养基中不含血清,包括:MEM培养基;和添加剂,其中,以所述无血清培养基的总体积计,所述添加剂的组成及各成分的终浓度如下所示:L-丙氨酸的终浓度为36mgL;L-盐酸精氨酸的终浓度为410mgL;L-天门冬氨酸的终浓度为145mgL;L-门冬酰胺的终浓度为240mgL;L-半胱氨酸盐酸盐一水的终浓度为100mgL;L-胱氨酸二盐酸盐的终浓度为118mgL;L-谷氨酸的终浓度为188mgL;L-谷氨酰胺的终浓度为468.4mgL;甘氨酸的终浓度为92mgL;L-盐酸组氨酸一水的终浓度为51mgL;L-羟脯氨酸的终浓度为56mgL;L-异亮氨酸的终浓度为200mgL;L-亮氨酸的终浓度为345mgL;L-盐酸赖氨酸的终浓度为166mgL;L-甲硫氨酸的终浓度为105mgL;L-苯丙氨酸的终浓度为135mgL;L-脯氨酸的终浓度为136mgL;L-丝氨酸的终浓度为240mgL;L-苏氨酸的终浓度为113mgL;L-色氨酸的终浓度为32mgL;L-缬氨酸的终浓度为84mgL;丙酮酸钠的终浓度为88mgL;酵母水解物的终浓度为2400mgL;大豆水解物的终浓度为1600mgL;D-无水葡萄糖的终浓度为3200mgL;氯化钾的终浓度为150.4mgL;无水磷酸氢二钠的终浓度为252mgL;还原型谷胱甘肽的终浓度为0.268mgL;七水硫酸亚铁的终浓度为0.776mgL;七水硫酸锌的终浓度为5.04mgL;维生素C的终浓度为1.6mgL;氯化胆碱的终浓度为32mgL;D-泛酸钙的终浓度为10.12mgL;叶酸的终浓度为0.96mgL;肌醇的终浓度为24.8mgL;烟酰胺的终浓度为0.6mgL;盐酸吡哆醛的终浓度为0.84mgL;维生素B6的终浓度为1.36mgL;维生素B1的终浓度为2.256mgL;维生素B12的终浓度为3.024mgL;牛磺酸的终浓度为16mgL;D-生物素的终浓度为0.32mgL;EGF的终浓度为0.008mgL;五水硫酸铜的终浓度为0.4mgL;重组人胰岛素的终浓度为4mgL;D-核糖的终浓度为14mgL;硫酸葡聚糖的终浓度为8mgL;L-酪氨酸二钠盐无水的终浓度为0.176mgL;六水氯化镁的终浓度为28.16582033mgL;次黄嘌呤的终浓度为1.12023149mgL;亚油酸的终浓度为0.02240463mgL;1,4-丁二胺二盐酸盐的终浓度为0.104mgL;维生素B2的终浓度为0.160049605mgL;胸苷的终浓度为0.208042991mgL;对氨基苯甲酸的终浓度为0.272056219mgL;硫辛酸的终浓度为0.3856mgL;氢化可的松的终浓度为0.0808mgL;亚硒酸钠的终浓度为0.036mgL;乙醇胺的终浓度为9.7728mgL;柠檬酸铁的终浓度为43.2mgL;3,3'5-三碘-L-甲状腺原氨酸的终浓度为0.00016mgL;氯化铝的终浓度为0.000871152mgL;乙酸钡的终浓度为0.002504563mgL;六水氯化钴的终浓度为0.001088941mgL;四水氯化锰的终浓度为8.71152E-05mgL;氟化钠的终浓度为0.003266822mgL;氯化亚锡的终浓度为0.000762258mgL;氯化镉的终浓度为0.000762258mgL;二氧化锗的终浓度为0.000326682mgL;九水偏硅酸钠的终浓度为0.004355762mgL;氯化镍的终浓度为0.000108894mgL;偏钒酸铵的终浓度为0.000217788mgL;溴化钾的终浓度为2.72235E-05mgL;碘化钾的终浓度为8.71152E-05mgL;氯化铷的终浓度为4.35576E-06mgL;钼酸铵的终浓度为5.4447E-05mgL;硝酸银的终浓度为3.26682E-06mgL;F68的终浓度为1000mgL;HEPES的终浓度为1200mgL。

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