申请/专利权人：中国农业大学

申请日：2024-02-19

公开（公告）日：2024-05-10

公开（公告）号：CN118006678A

主分类号：C12N15/84

分类号：C12N15/84;A01H5/00;A01H6/00;A01H4/00

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.28#实质审查的生效;2024.05.10#公开

摘要：本发明公开了一种农杆菌介导白颖苔草愈伤组织遗传和转化方法。本发明提供了一种农杆菌介导白颖苔草愈伤组织遗传转化方法，包括如下步骤：1制备白颖苔草种子愈伤组织和用于侵染的农杆菌菌液；2将所述白颖苔草种子愈伤组织和所述用于侵染的农杆菌菌液共培养，得到共培养后愈伤组织；3将所述共培养后愈伤组织依次进行恢复培养、第一暗培养和第二暗培养，得到抗性愈伤组织；4将所述抗性愈伤组织依次进行分化培养和生根培养，即得到转基因白颖苔草。本发明方法，填补了当前白颖苔草遗传转化体系的空白。本发明培养过程速度快，转化频率较高，变异率较低，周期相对较短，能较好地保持白颖苔草的遗传稳定性。

主权项：1.一种农杆菌介导白颖苔草愈伤组织遗传转化方法，包括如下步骤：1制备白颖苔草种子愈伤组织和用于侵染的农杆菌菌液；所述用于侵染的农杆菌菌液按照如下方法制备：将表达待转染基因的农杆菌进行培养得到菌液，收集菌体后重悬，即得到用于侵染的农杆菌菌液；2将所述白颖苔草种子愈伤组织和所述用于侵染的农杆菌菌液共培养，得到共培养后愈伤组织；3将所述共培养后愈伤组织依次进行恢复培养、第一暗培养和第二暗培养，得到抗性愈伤组织；所述恢复培养采用的培养基包括基础培养基、1.9-2.1mgL2,4-D激素、0.8-1.2mgL6-BA激素、0.8-1.2mgLNAA激素、25-30gL蔗糖、450-500mgL头孢霉素和200-250mgL特美汀；所述第一暗培养采用的培养基包括基础培养基、1.9-2.1mgL2,4-D激素、0.8-1.2mgL6-BA激素、0.8-1.2mgLNAA激素、25-30gL蔗糖、450-500mgL头孢霉素、200-250mgL特美汀和250-350mgL外源基因筛选抗生素；所述第二暗培养采用的培养基包括基础培养基、1.9-2.1mgL2,4-D激素、0.8-1.2mgL6-BA激素、0.8-1.2mgLNAA激素、25-30gL蔗糖、450-500mgL头孢霉素、200-250mgL特美汀和650-750mgL外源基因筛选抗生素；4将所述抗性愈伤组织依次进行分化培养和生根培养，即得到转基因白颖苔草。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业大学 一种农杆菌介导白颖苔草愈伤组织遗传和转化方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD