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提高细胞基因组中同源定向修复(HDR)效率的方法 

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申请/专利权人:百时美施贵宝公司

摘要:在某些实施方案中,本公开文本提供了用于提高细胞基因组中同源定向修复HDR效率的方法,其包括:a向所述细胞中引入:i核酸酶;和ii供体核酸,其包括有待插入基因组中的修饰序列;并且b使所述细胞经受从37℃到更低温度的温度转变;其中所述核酸酶在所述细胞中的切割位点切割基因组,并且所述供体核酸通过提高的HDR率引导用所述修饰序列修复基因组序列。

主权项:1.一种提高细胞基因组中同源定向修复(HDR)效率的方法,其包括:a向所述细胞中引入:i核酸酶;和ii单链供体核酸,其包括有待插入基因组中的修饰序列;并且b使所述细胞经受从37ºC到更低温度的温度转变,所述更低的温度在28ºC与35ºC之间;其中所述单链供体核酸含有对称同源臂,并且与基因组中被所述核酸酶切割的DNA链互补;其中所述核酸酶在所述细胞中的切割位点处切割基因组,并且所述单链供体核酸通过提高的HDR率引导用所述修饰序列修复基因组序列,其中所述细胞在所述更低温度下生长至少24小时。

全文数据:

权利要求:

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