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申请/专利权人：中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
申请日：2023-04-04
公开（公告）日：2024-05-21
公开（公告）号：CN116479091B
主分类号：C12Q1/682
分类号：C12Q1/682
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.05.21#授权;2023.08.11#实质审查的生效;2023.07.25#公开
摘要：本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种基于SplintR连接酶触发的磁珠表面原位滚环扩增的microRNA检测方法。包括以下步骤：S1：寡核苷酸DNA单链P1、P2在SplintR连接酶的作用下与靶标microRNA形成P1‑P2‑miRNA双链复合物，再通过加热变性使得双链复合物释放成P1‑P2单链和microRNA；S2：链霉亲和素修饰的磁珠吸附富集P1‑P2单链；S3：磁珠表面进行原位滚环扩增，原位滚环扩增将P2段作为RCA反应引物序列；S4：荧光检测。本发明方法通过靶标microRNA支架连接两条单链DNA，结合磁珠表面原位RCA实现microRNA的单碱基错配识别，达到高特异、高灵敏、快速检测。
主权项：1.非疾病诊断或治疗目的的基于SplintR连接酶触发的磁珠表面原位滚环扩增的microRNA检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：寡核苷酸DNA单链P1、P2在SplintR连接酶的作用下与靶标microRNA形成P1-P2-microRNA双链复合物，再通过加热变性使得双链复合物释放成P1-P2单链和microRNA；P1链的5’端修饰有生物素基团、3’端有羟基，P2链的5’端修饰有磷酸基团，P1-P2和靶标microRNA序列完全互补；S2：链霉亲和素修饰的磁珠吸附富集P1-P2单链；S3：磁珠表面进行原位滚环扩增，原位滚环扩增将P2段作为RCA反应引物序列；S4：荧光检测。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院 基于SplintR连接酶触发的磁珠表面原位滚环扩增的microRNA检测方法
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