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申请/专利权人：深圳市真迈生物科技有限公司;深圳市龙岗区妇幼保健院
摘要：本发明提出了一种构建测序文库的方法，所述方法包括：将具有3’末端polyA尾的DNA单链与过量的特殊的接头在连接酶的作用下进行3’端接头连接处理；将连接处理产物进行RNA消化处理；以RNA消化处理产物为模板，在延伸引物存在的条件下进行延伸处理；将延伸处理产物与5’端接头进行5’端接头连接处理；将连接处理产物进行PCR扩增，以便获得测序文库。该方法能够提高整体建库效率，减少降解样本中短核酸片段的流失，从而为处理严重降解样本的测序文库构建提供了一种可行、高效的解决方案。
主权项：1.一种构建测序文库的方法，其特征在于，包括：将具有3’末端polyA尾的DNA单链与过量的接头进行3’端接头连接处理，所述接头包括：第一链，所述第一链为DNA链；第二链，所述第二链为RNA链，所述RNA链的5’端上游的至少部分序列与所述第一链互补配对，所述RNA链的3’端上游的至少部分序列为多个连续的U；将连接处理产物进行RNA消化处理；以RNA消化处理产物为模板，在延伸引物存在的条件下进行延伸处理，所述延伸引物的3’端上游的至少部分序列与所述接头的第一链的5’端上游的至少部分序列互补配对；将延伸处理产物与5’端接头进行5’端接头连接处理，所述5’端接头包括所述接头的第一链和所述延伸引物，所述延伸引物的3’端上游的至少部分序列与所述的接头的第一链的5’端上游的至少部分序列互补配对；将连接处理产物进行PCR扩增，以便获得测序文库。
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百度查询： 深圳市真迈生物科技有限公司 深圳市龙岗区妇幼保健院 一种构建测序文库的方法
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