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一种根癌农杆菌介导的老芒麦遗传转化方法 

申请/专利权人:西南科技大学;中国科学院青岛生物能源与过程研究所

申请日:2024-03-21

公开(公告)日:2024-05-28

公开(公告)号:CN118086380A

主分类号:C12N15/84

分类号:C12N15/84;A01H5/00;A01H6/46;A01H4/00

优先权:["20230421 CN 202310430867X"]

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.06.14#实质审查的生效;2024.05.28#公开

摘要:本发明涉及一种根癌农杆菌介导的老芒麦遗传转化方法,属于植物组培技术和植物转基因技术领域,所述方法具体包括获得老芒麦组培无菌愈伤组织、转化农杆菌感受态、活化根癌农杆菌、侵染老芒麦愈伤组织及共培养、植物转化材料的愈伤组织筛选培养、分化筛选培养和生根培养;本发明方法以高浓度的6‑BA与高浓度的蔗糖配合使用并筛选得到了适合侵染老芒麦愈伤组织,使老芒麦分化效率达到30%以上,得到了老芒麦愈伤组织分化而来的阳性再生植株。

主权项:1.一种根癌农杆菌介导的老芒麦遗传转化方法,其特征在于,所述方法具体包括获得老芒麦组培无菌愈伤组织、转化农杆菌感受态、活化根癌农杆菌、侵染老芒麦愈伤组织及共培养、植物转化材料的愈伤组织筛选培养、分化筛选培养和生根培养;所述的分化筛选培养的培养基是在MS基础培养基中添加终浓度60g·L-1蔗糖、7.8g·L-1琼脂、3mg·L-16-BA、300mg·L-1特美汀和5mg·L-1潮霉素,14-21天继代一次;经过2-3月筛选培养之后,未转化材料死亡,阳性愈伤组织进行分化获得分化苗;培养条件为27℃下,光照强度2000lx,光周期为14小时光照10小时黑暗;所述的生根培养为待分化苗在长至4-6cm时,将分化苗继代在生根培养基上;在27℃下,光照强度2000lx,光周期为14小时光照10小时黑暗,培养10-20天老芒麦生根;生根培养基是在12MS基本培养基中添加15g·L-1蔗糖、7.8g·L-1琼脂和300mg·L-1特美汀。

全文数据:

权利要求:

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