申请/专利权人:麦里生物科技(上海)有限公司
申请日:2024-03-28
公开(公告)日:2024-06-14
公开(公告)号:CN118184779A
主分类号:C07K16/24
分类号:C07K16/24;C07K1/22
优先权:
专利状态码:在审-公开
法律状态:2024.06.14#公开
摘要:本专利申请公开了一种抗犬IL‑31单克隆抗体的纯化方法。该纯化方法包括:A.使用平衡缓冲液对亲和层析柱进行平衡;B.将包含抗犬IL‑31单克隆抗体的细胞发酵上清液上样于亲和层析柱;C.再次使用所述平衡缓冲液对所述亲和层析柱进行平衡,直至所述细胞发酵上清液完全流过所述亲和层析柱;D.使用淋洗缓冲液对所述亲和层析柱进行淋洗;E.再次使用平衡缓冲液对所述亲和层析柱进行平衡;和F.使用洗脱液对所述亲和层析柱进行洗脱,收集包含抗犬IL‑31单克隆抗体洗脱峰的洗脱液,从而得到经纯化的抗犬IL‑31单克隆抗体的溶液。经纯化的抗犬IL‑31单克隆抗体的溶液中的HCP含量可以低于10ngmL。
主权项:1.一种抗犬IL-31单克隆抗体的纯化方法,其包括以下步骤:A.使用平衡缓冲液对亲和层析柱进行平衡;然后B.将包含抗犬IL-31单克隆抗体的细胞发酵上清液上样于亲和层析柱;然后C.再次使用所述平衡缓冲液对所述亲和层析柱进行平衡,直至所述细胞发酵上清液完全流过所述亲和层析柱;然后D.使用淋洗缓冲液对所述亲和层析柱进行淋洗;然后E.再次使用平衡缓冲液对所述亲和层析柱进行平衡;然后F.使用洗脱液对所述亲和层析柱进行洗脱,收集包含抗犬IL-31单克隆抗体洗脱峰的洗脱液,从而得到经纯化的抗犬IL-31单克隆抗体的溶液;其中,所述平衡缓冲液是100~120mmolLNaCl、50~60mmolLKCl、10~15mmolLNa2HPO4和20~25mmolLKH2PO4、pH6.5~7.5的水溶液;所述亲和层析柱是蛋白A亲和层析柱;所述淋洗缓冲液是80-110mmolL柠檬酸钠、120-150mmolLNaCl和5-7mmolL柠檬酸、pH6.0的水溶液;所述洗脱液是5~8mmolL乙酸钠和85~95mmolL乙酸、pH3.2~3.4的水溶液。
全文数据:
权利要求:
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