申请/专利权人：天津大学

申请日：2024-05-06

公开（公告）日：2024-06-14

公开（公告）号：CN118185975A

主分类号：C12N15/74

分类号：C12N15/74;C12N15/113;C12N15/60;C12N15/31;C12P19/12;C12P7/40;C12N1/21;C12R1/01

优先权：

专利状态码：失效-发明专利申请公布后的撤回

法律状态：2024.06.14#发明专利申请公布后的撤回;2024.06.14#公开

摘要：本发明公开了一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，包括：步骤S1，以质粒pUC‑tho为模板扩增得到Ptho；步骤S2，以集胞藻6803基因组为模板扩增得到Pcpc560；步骤S3，以质粒pUC‑PAL为模板扩增得到pal；步骤S4，以质粒pUC‑cscB为模板扩增得到cscB；步骤S5，以整合型质粒Pcp3031为模板扩增得到Trbcl；步骤S6，将Pcpc560、pal、Trbcl进行融合，并与表达载体pSI‑SPE进行连接，将形成的重组表达载体转入聚球藻7942中，得到可生产反式肉桂酸的菌株7942‑PAL；步骤S7，将Ptho、cscB、Trbcl进行融合，并与表达载体pSⅡ‑CM进行连接，形成的重组表达载体转入可生产反式肉桂酸的菌株7942‑PAL中，得到光驱合成蔗糖和反式肉桂酸的菌株7942‑CP。能够仅依靠光照和CO2，就能实现蔗糖和反式肉桂酸的同时生物合成。

主权项：1.一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，其特征在于，包括：步骤S1，以质粒pUC-tho为模板扩增得到茶碱诱导型启动子Ptho；步骤S2，以集胞藻6803基因组为模板扩增得到强启动子Pcpc560；步骤S3，以质粒pUC-PAL为模板扩增得到拟南芥苯丙氨酸裂解酶基因pal；步骤S4，以质粒pUC-cscB为模板扩增得到大肠杆菌W蔗糖转运蛋白基因cscB；步骤S5，以整合型质粒Pcp3031为模板扩增得到终止子Trbcl；步骤S6，将强启动子Pcpc560、拟南芥苯丙氨酸裂解酶基因pal、终止子Trbcl进行融合，并与表达载体pSI-SPE进行连接，将形成的重组表达载体1转入聚球藻7942中，得到可生产反式肉桂酸的菌株7942-PAL；步骤S7，将茶碱诱导型启动子Ptho、大肠杆菌W蔗糖转运蛋白基因cscB、终止子Trbcl进行融合，并与表达载体pSⅡ-CM进行连接，形成的重组表达载体2转入可生产反式肉桂酸的菌株7942-PAL中，即可得到光驱合成蔗糖和反式肉桂酸的菌株7942-CP。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 天津大学 一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法

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