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【发明授权】基于环糊精包合的免分离化学发光免疫分析的方法_博以新(杭州)生物技术有限公司_202110779736.3 

申请/专利权人:博以新(杭州)生物技术有限公司

申请日:2021-07-09

公开(公告)日:2024-06-14

公开(公告)号:CN113504371B

主分类号:G01N33/58

分类号:G01N33/58;G01N33/532;G01N33/535;G01N33/53;G01N33/577;G01N33/74;G01N33/68;G01N33/574;G01N21/76

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.14#授权;2021.11.02#实质审查的生效;2021.10.15#公开

摘要:本发明属于生物检测领域,具体涉及一种基于环糊精包合的免分离化学发光免疫分析的方法。本发明应用环糊精包合吖啶酯类似物开发了一种灵敏度更高、特异性更强、自动化程度更高的新型免分离的化学发光免疫分析技术,应用环糊精包合吖啶酯类似物作为发光包合物,环糊精的空腔结构可以包合大量的吖啶酯,从而使发光信号值增强,因而具有信号放大的作用;该方法无需微孔板、磁珠、微球等载体,检测过程中无需洗涤步骤,操作简单用时少,并且灵敏度高、重复性好,生产工艺简单易于放大生产,并且检测过程便捷对于检测仪器要求低,易于实现全自动化。

主权项:1.一种基于环糊精包合的免分离化学发光免疫分析的方法,其特征在于,所述方法包括,抗体1与β-环糊精包合的吖啶酯类似物连接,得到发光包合物连接的抗体1;抗体2连接辣根过氧化物酶,得到酶连接的抗体2;将发光包合物连接的抗体1、酶连接的抗体2、待测样本以及本底抑制剂混合并孵育后,加入激发液,检测发光信号值;其中:所述β-环糊精包合的吖啶酯类似物的具体制备方法为:称取1mg吖啶酯类似物A溶于1mlDMF中,得到吖啶酯类似物溶液,将其加入1ml1%β-环糊精β-CD水溶液中,37℃搅拌5小时,加入无水乙醇20ml,静置2小时后,将溶液加入截留分子量为1500的透析袋中,放于PBS缓冲液中25℃透析1天,期间更换3次PBS缓冲液,冷冻干燥制得;所述发光包合物连接的抗体1的具体制备方法为:将1mg发光包合物β-CDA在2mlDMF中溶解,取溶解的β-CDA50ul加入100ul浓度为10mgml的抗体1中,然后加入0.05M硼酸缓冲液800ul,1%戊二醛50ul,反应1小时;将反应溶液1ml加入截留分子量为10000的透析袋中,放于PBS缓冲液中4℃透析1天,期间更换3次PBS缓冲液。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 博以新(杭州)生物技术有限公司 基于环糊精包合的免分离化学发光免疫分析的方法

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