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一种用于鉴定检测脂肪酸与蛋白质相互作用的方法 

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申请/专利权人:国科大杭州高等研究院

摘要:本发明涉及生物学鉴定检测的技术领域,公开了一种用于鉴定检测脂肪酸与蛋白质相互作用的方法,包括如下步骤:S1、将体积比为2:5:5:2的酰肼琼脂糖珠水溶液、EDC的甲醇溶液、吡啶的甲醇溶液和脂肪酸的甲醇溶液混匀,在5~40℃下水浴反应20~60min,得到脂肪酸琼脂糖树脂;S2、将脂肪酸琼脂糖树脂与非变性蛋白混合物混合后孵育;S3、离心并去掉上清液后,加入尿素缓冲液和二硫苏糖醇水溶液反应,得到与脂肪酸互作的蛋白;S4、酶切后,得到蛋白肽段;S5、质谱鉴定。本发明通过将脂肪酸直接连接在琼脂糖树脂上,所得脂肪酸琼脂糖树脂能与多个蛋白互作,从而对蛋白质进行系统鉴定,处理过程更为简单便捷。

主权项:1.一种用于鉴定检测脂肪酸与蛋白质相互作用的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、将体积比为2:5:5:2的酰肼琼脂糖珠水溶液、EDC的甲醇溶液、吡啶的甲醇溶液和脂肪酸的甲醇溶液混匀,在5~40℃下水浴反应20~60min,反应结束后离心,去掉上清液,得到脂肪酸琼脂糖树脂;S2、将脂肪酸琼脂糖树脂与非变性蛋白混合物混合后孵育;S3、离心并去掉上清液后,加入尿素缓冲液和二硫苏糖醇水溶液反应,得到与脂肪酸互作的蛋白;S4、酶切后,得到蛋白肽段;S5、质谱鉴定。

全文数据:

权利要求:

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