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申请/专利权人：首都儿科研究所
申请日：2024-05-22
公开（公告）日：2024-06-18
公开（公告）号：CN118207347A
主分类号：C12Q1/689
分类号：C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/21
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.18#公开
摘要：本发明涉及检测技术领域，尤其涉及一种基于CRISPR‑Cas12a系统的流感嗜血杆菌的快速检测方法，包括：将流感嗜血杆菌的目的基因采用多交叉置换扩增MCDA技术进行扩增，得到扩增产物；将扩增产物采用簇状规则间隔短回文重复序列相关蛋白CRISPR‑Cas12a系统进行检测。针对现有检测技术难以快速对流感嗜血杆菌进行检测的问题，公开了一种基于CRISPR‑Cas12a系统的流感嗜血杆菌的检测方法能够准确、快速、超灵敏、高特异性检测流感嗜血杆菌。
主权项：1.一种基于CRISPR-Cas12a系统的流感嗜血杆菌的检测方法，其特征在于，包括：提取目的基因的基因组DNA；利用多交叉置换扩增方法对所述基因组DNA进行扩增，得到扩增产物；其中，所述多交叉置换扩增的方法使用的扩增引物包括置换引物对、第一扩增引物对、第二扩增引物对、第三扩增引物对和交叉引物对，其中，所述交叉引物对包括插入了PAM序列的正向交叉引物和反向交叉引物；gRNA和CRISPR-Cas12a蛋白形成复合物；所述复合物与所述扩增产物形成三元复合物并对单链DNA探针分子进行切割，得到剪切产物；利用荧光基团和淬灭基团对剪切产物进行标记；利用标记后的剪切产物进行荧光检测。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 首都儿科研究所 基于CRISPR-Cas12a系统的流感嗜血杆菌的快速检测方法
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