申请/专利权人:康彤(上海)生物研发有限公司
申请日:2023-05-12
公开(公告)日:2024-06-18
公开(公告)号:CN116769746B
主分类号:C12N9/10
分类号:C12N9/10;C12N15/81;C12N15/62
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.06.18#授权;2023.10.10#实质审查的生效;2023.09.19#公开
摘要:本发明提供了一种提高毕赤酵母分泌环糊精葡萄糖基转移酶能力的方法,属于生物学技术领域,该菌种通过P2A顺反子序列将多个信号肽串联,再连接环糊精葡萄糖基转移酶基因,采用食品安全菌株巴斯德毕赤酵母作为底盘菌进行异源表达,可有效促进了环糊精葡萄糖基转移酶的分泌。本发明显著提高了胞外的蛋白分泌含量,50L发酵罐120h后,发酵液上清蛋白浓度可达10.2gL,环糊精葡萄糖基转移酶的环化活力可达65.2Uml,较原始表达系统提高了10倍。
主权项:1.一种提高毕赤酵母分泌环糊精葡萄糖基转移酶能力的方法,其特征在于:通过P2A序列串联后形成信号肽α信号肽和DSE4信号肽,所述信号肽的核苷酸序列如SEQIDNO.1或SEQIDNO.2所示;将来源于Porcineteschovirus的所述P2A序列和源于Pichiapastoris的所述DSE4信号肽通过同源重组方式依次连接至pPIC9k载体的α信号肽后面,所述pPIC9k载体自带α信号肽,获得重组载体pPIC9K-DS。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 康彤(上海)生物研发有限公司 一种提高毕赤酵母分泌环糊精葡萄糖基转移酶能力的方法
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