申请/专利权人：中南大学湘雅医院

申请日：2024-03-27

公开（公告）日：2024-06-25

公开（公告）号：CN118240938A

主分类号：C12Q1/6886

分类号：C12Q1/6886;C12Q1/686;C12N15/11

优先权：["20231218 CN 2023117399997"]

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.06.25#公开

摘要：一种ddPCR定量检测2种急性淋巴细胞白血病融合基因的方法与试剂盒，一种基于数字PCR定量检测急性淋巴细胞白血病相关融合基因表达的引物组合，其特征在于，包括：根据2种急性淋巴细胞白血病相关融合基因：TEL‑AML1和E2A‑PBX1的基因序列设计的多条特异性引物，以及根据正常的ABL1基因序列设计的内参引物。

主权项：1.一种基于数字PCR定量检测急性淋巴细胞白血病相关融合基因表达的引物组合，其特征在于，包括：根据2种急性淋巴细胞白血病相关融合基因：TEL-AML1和E2A-PBX1的基因序列设计的多条特异性引物，以及根据正常的ABL1基因序列设设计的内参引物；用于检测TEL-AML1融合基因的SeqIDNo.1-2所示核苷酸序列的引物和SeqIDNo.7所示核苷酸序列的探针；用于检测E2A-PBX1融合基因的SeqIDNo.3-4所示核苷酸序列的引物和SeqIDNo.8所示核苷酸序列的探针；用于检测ABL1基因内参的SeqIDNo.5-6所示核苷酸序列的引物和SeqIDNo.9所示核苷酸序列的探针；筛选扩增效率一致且阴性阳性微滴明显分离的引物，最终选定的检测用引物和探针序列如下： 序列号 序列名称 核酸序列5’-3’ SEQIDNO.1 TEL-AML1-F1 GTCTCTGTCTCCCCGCCTG SEQIDNO.2 TEL-AML1-R1 GGCGGCTCGTGCTGGCAT SEQIDNO.3 E2A-PBX1-F1 CACCAGCCTCATGCACAACC SEQIDNO.4 E2A-PBX1-R1 CTGGGCTCCTCGGATACTCAAAA SEQIDNO.5 ABL1-F1 GGGCGTGTGGAAGAAATA SEQIDNO.6 ABL1-R1 ACCAGGTTAGGGTGTTTGA SEQIDNO.7 TEL-AML1-P1 TCTCCCAATGGGCATGGCGTG SEQIDNO.8 E2A-PBX1-P1 CACCCTCCCTGACCTGTCTCGGC SEQIDNO.9 ABL1-P1 AGACCTTGAAGGAGGACACC 所述探针的5’端连接荧光报告基团，3’端淬灭基团连接；用于检测TEL-AML1融合基因的探针5’端标记为HEX荧光修饰，3’端标记为BHQ1淬灭修饰；用于检测E2A-PBX1融合基因的探针5’端标记为CY5荧光修饰，3’端标记为BHQ2淬灭修饰；用于检测ABL1基因内参的探针5’端标记为ROX荧光修饰，3’端标记为BHQ2淬灭修饰。

全文数据：

权利要求：

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